24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2172  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

雪碧三块五

铁虫 (初入文坛)

[求助] 第一次pcr产物无条带,第二次有条带 已有1人参与

第一次pcr电泳检测无条带,只有二聚体
用第一次pcr产物直接进行二次pcr就有条带出现
请教各位大神这是什么情况
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雪碧三块五

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 673643401 at 2015-08-06 15:20:17
第二次的PCR条带是你的目的条带吗?你这种情况原因很多
PCR扩增条件、模板、buffer、退火温度等。把你的实验条件和步骤写详细点

是目的条带
buffer2.5 mg2 dntp0.25 酶0.2 引物各加0.5 模板20ng
预变性95,7min
95,1min
61,1min
72,30s
28个循环

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-08-06 16:04:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

673643401

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
第二次的PCR条带是你的目的条带吗?你这种情况原因很多
PCR扩增条件、模板、buffer、退火温度等。把你的实验条件和步骤写详细点
2楼2015-08-06 15:20:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

673643401

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 雪碧三块五 at 2015-08-06 16:04:42
是目的条带
buffer2.5 mg2 dntp0.25 酶0.2 引物各加0.5 模板20ng
预变性95,7min
95,1min
61,1min
72,30s
28个循环
...

建议把退火温度降低点,55度试一下。你的体系我看不懂,我一般是以体积为单位的
4楼2015-08-06 16:14:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雪碧三块五

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 673643401 at 2015-08-06 16:14:47
建议把退火温度降低点,55度试一下。你的体系我看不懂,我一般是以体积为单位的...

都是ul啊,模板是ng

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2015-08-06 17:25:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 4/200 2026-04-17 11:18 by czyzsu
[考研] 335求调剂 +20 想上岸呀!! 2026-04-12 23/1150 2026-04-17 10:50 by cuisz
[考研] 急需调剂 +7 绝不放弃22 2026-04-15 7/350 2026-04-16 22:09 by SUSE_CL
[考研] 294求调剂 +14 淡然654321 2026-04-15 14/700 2026-04-16 21:01 by lpl364211
[考研] 0831生医工第一轮调剂失败求助 +14 小熊睿睿_s 2026-04-11 18/900 2026-04-16 20:41 by lpl364211
[考研] 求助调剂,跨调 +19 X十甫寸Y 2026-04-11 20/1000 2026-04-15 21:18 by cuisz
[考研] 考研调剂 +13 长弓傲 2026-04-13 14/700 2026-04-14 14:44 by zs92450
[考研] 考研求调剂 +12 子木呐 2026-04-12 13/650 2026-04-14 01:19 by 王珺璞
[考研] 2026硕士调剂_能动_河南农业大学 +4 河南农业大学-能 2026-04-12 4/200 2026-04-13 22:01 by bljnqdcc
[考研] 材料考研调剂 +29 云木达达 2026-04-11 31/1550 2026-04-13 13:32 by lyh鲁老师
[考研] 290求调剂 +18 柯淮然 2026-04-12 20/1000 2026-04-13 12:56 by cyh—315
[考研] 一志愿085802 323分求调剂 +13 drizzle_9 2026-04-12 14/700 2026-04-13 10:26 by Faiz5552
[考研] 346分,工科0854求调剂,专硕 +6 moser233 2026-04-12 7/350 2026-04-12 22:11 by fqwang
[教师之家] 山东双非院校考核超级无底线,领导幸灾乐祸,教师遭殃恐 +3 qut2026 2026-04-11 7/350 2026-04-12 20:24 by qut2026
[考研] 359求调剂 +5 胃痉挛累了 2026-04-11 5/250 2026-04-11 19:55 by lbsjt
[考研] 调剂求助 +6 果然有我 2026-04-11 7/350 2026-04-11 16:22 by 明月此时有
[考研] 求调剂,一志愿大连理工大学354分 +5 雨声余生 2026-04-11 6/300 2026-04-11 16:12 by 雨声余生
[考研] 农学0904 312求调剂 +6 Say Never 2026-04-10 6/300 2026-04-11 10:33 by wwj2530616
[考研] 346,工科0854求调剂,专硕 +7 moser233 2026-04-10 8/400 2026-04-11 08:52 by 猪会飞
[考研] 初试261 +3 Asht少 2026-04-10 6/300 2026-04-10 16:38 by Asht少
信息提示
请填处理意见