应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 一种DNA一种引物PCR之后是不是只用一个条带？
81/1返回列表
查看: 1485  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

比永远都要远

新虫 (初入文坛)

[求助] 一种DNA一种引物PCR之后是不是只用一个条带？ 已有3人参与

使用一个DNA样品，一种引物，进行PCR扩增（设置8个温度梯度），120V电压，70min，照胶出来就只有一个条带，我的结果有问题吗？

一种DNA一种引物PCR之后是不是只用一个条带？
PCR.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-08-05 19:52:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-05 23:00:17
你这个图看起来并不是一条带，是弥散带。另外你的DNA是基因组DNA？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2015-08-05 21:52:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

比永远都要远

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2015-08-05 21:52:47
你这个图看起来并不是一条带，是弥散带。另外你的DNA是基因组DNA？

是的我的DNA 是基因组DNA ,那什么原因产生的弥散呢？
赞一下 回复此楼
3楼2015-08-07 11:24:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by 比永远都要远 at 2015-08-07 11:24:15
是的我的DNA 是基因组DNA ,那什么原因产生的弥散呢？...

基因组DNA用单引物扩，扩出来的是一系列长度不一致的片段，所以应该是弥散带。
赞一下 回复此楼
4楼2015-08-07 21:43:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

比永远都要远

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by stone2239 at 2015-08-07 21:43:41
基因组DNA用单引物扩，扩出来的是一系列长度不一致的片段，所以应该是弥散带。...

您的意思是说我加的是单引物？


还有我做了一个稀释DNAD浓度的对比试验跑出来结果是这样的，中间跑出来的条带的是一个稀释浓度
一种DNA一种引物PCR之后是不是只用一个条带？-1
2015年8月6号降低模板DNA浓度出现条带.jpg
赞一下 回复此楼
5楼2015-08-08 14:51:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
比永远都要远: 金币+10 2015-08-11 13:00:48
引用回帖:
5楼: Originally posted by 比永远都要远 at 2015-08-08 14:51:37
您的意思是说我加的是单引物？


还有我做了一个稀释DNAD浓度的对比试验跑出来结果是这样的，中间跑出来的条带的是一个稀释浓度

2015年8月6号降低模板DNA浓度出现条带.jpg
...

哦，你说的一种引物是指一对引物，是吗？我理解错了，还以为你用的一条引物扩增的。从你后面这个图看，应该是DNA浓度过高，既然稀释后扩出来了就用稀释后的扩，一般DNA模板量在10-200ng范围内。
赞一下 回复此楼
6楼2015-08-10 10:08:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

产生弥散的原因有很多，你这个估计是样品吧酶处理好 看看这篇文章，有解决弥散提高特异性的不错http://www.detaibio.com/topics/pcr-faq-specific-amplify.html
赞一下 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
7楼2015-08-10 10:52:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fly_锋

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

其实楼主的第一张图，是在不同温度下的结果，跑出这样其实是算不错的，结果表明第三个孔的温度是最适合你的引物的。这个类似于筛选最佳温度。另外最后两个孔在较高位置好像也出现条带，你得根据产物大小，确定下，到底那个是你要的。至于降解拖带这个问题，有好多解释，看你后续做什么了，如果就是测个序什么的，这也是没有问题的
。希望可以帮到你！
赞一下 回复此楼
8楼2015-08-10 11:01:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 比永远都要远 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +5 yufeiwaner 2026-08-09 5/250 2026-08-10 08:15 by BlakeReary
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +7 Lanmanbaby 2026-08-09 14/700 2026-08-09 23:33 by Tide man
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +4 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-09 22:24 by otj2008
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +15 且听虎啸 2026-08-07 22/1100 2026-08-09 22:13 by 布布和一二
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +10 布布和一二 2026-08-08 21/1050 2026-08-09 17:21 by 天神眷顾
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 5/250 2026-08-08 21:54 by 13586093586
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 好奇怪的filecode +3 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-08 17:46 by zhanghaozhu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭