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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 求助关于red 同源重组的问题
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周志惠

新虫 (小有名气)

[求助] 求助关于red 同源重组的问题 已有1人参与

red同源重组，已经扩增出缺失一部分序列的目的片段，中间必须需要插入抗性基因才能重组吗？
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1楼 2015-08-05 19:14:58
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周志惠

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lucklizhen at 2015-08-05 21:28:30
如果没有抗性基因的话，重组后没法筛选阳性克隆啊。你可以把抗性基因两端放上酶切位点，这样的话你得到的正确克隆后做酶切。然后做个自连接就可以了。要记得测序哦。

为什么要自连呢？我就是现在这个抗性基因连不上同源臂中间
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3楼2015-08-06 11:51:10
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lucklizhen

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果没有抗性基因的话，重组后没法筛选阳性克隆啊。你可以把抗性基因两端放上酶切位点，这样的话你得到的正确克隆后做酶切。然后做个自连接就可以了。要记得测序哦。
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2楼2015-08-05 21:28:30
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lucklizhen

新虫 (正式写手)
同源臂多长？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2015-08-06 18:24:58
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周志惠

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lucklizhen at 2015-08-06 18:24:58
同源臂多长？

700多bp
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5楼2015-08-07 13:23:39
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