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weizhi111

至尊木虫 (正式写手)

[求助] 怎样提高融合蛋白表达量 已有6人参与

在BL21菌株中诱导表达蛋白,用的是GST标签,做了几次发现上清里面诱导的蛋白很少,挂柱洗脱后几乎看不见条带。沉淀(包涵体)蛋白还比较多。诱导条件试过IPTG 0.5mM 16度过夜,但IPTG 改成0.3mM 16度过夜后总体诱导表达量就减少了,上清沉淀都少,该怎么解决呢?最后蛋白是要用来测酶活的,所以诱导纯化过程不能破坏酶活。请有经验者帮助!
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whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
bl21并非全能表达系统 尤其是一些分子量较大的真核蛋白 在表达时容易形成包涵体 调整诱导表达条件确实能够提高可溶性表达 但程度有限 可以尝试更换表达系统

[ 发自小木虫客户端 ]
15楼2015-08-05 07:20:12
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