24小时热门版块排行榜    

查看: 3428  |  回复: 25
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

weizhi111

至尊木虫 (正式写手)

[求助] 怎样提高融合蛋白表达量 已有6人参与

在BL21菌株中诱导表达蛋白,用的是GST标签,做了几次发现上清里面诱导的蛋白很少,挂柱洗脱后几乎看不见条带。沉淀(包涵体)蛋白还比较多。诱导条件试过IPTG 0.5mM 16度过夜,但IPTG 改成0.3mM 16度过夜后总体诱导表达量就减少了,上清沉淀都少,该怎么解决呢?最后蛋白是要用来测酶活的,所以诱导纯化过程不能破坏酶活。请有经验者帮助!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cs冰凝

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
通过变性再复性,这样酶活也可以保证!不知你破菌是用超声还是高压破碎机?

[ 发自小木虫客户端 ]
唯地生物,您身边的感受态专家
6楼2015-08-03 18:56:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 weizhi111 的主题更新
信息提示
请填处理意见