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定点突变问题，做的很不顺啊，希望哪位大神指点一下 已有5人参与
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| 求助，想请问做基因的定点突变，引物如何设计，有什么原则吗？比如说是C变成A，G变成T？，是不是得到的产物只要在预测网站上显示，不再出现对应的转录因子结合位点就可以啊。。。最近做的很不顺，总是出现其他的突变，并且得到的产物比目的序列长几十bp，真是太头疼了。。。希望各位大神能帮助我分析分析啊，拜托！ |
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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| 我也是做定点突变的，突变位点的引物我是在线设计的http://www.bioinformatics.org/primerx/cgi-bin/DNA_1.cgi，这个网址应该能帮助你，而且也很容易设计，还有一对引物就用之前扩增目的基因全长的那对引物就好了，用重叠延伸PCR做定点突变较为快捷，而且PCR过程中要用高保真酶防止上下游片段尾部加A，我用的是TAKARA的pfu酶，挺好用的。 |
3楼2015-08-03 11:19:06
随风飘摇11
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2楼2015-08-03 08:25:52
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5楼2015-09-17 14:45:25
