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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 农杆菌介导酵母转化
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潇潇杨雨125

银虫 (小有名气)

[求助] 农杆菌介导酵母转化 已有2人参与

农杆菌介导酵母转化时，第二次转膜是倒扣贴在平板上还是正着，转完后多久揭掉膜？还是在膜上生长？？谢谢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2015-07-28 09:39:30
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有必要用农杆菌介导吗？酵母貌似蛮好转化的

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2楼2015-07-28 10:08:50
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枭翔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
潇潇杨雨125: 金币+5 2015-07-28 19:26:03
正着就可以了，大约2d就可以，转化子能够在膜上生长
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3楼2015-07-28 14:07:08
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潇潇杨雨125

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-07-28 10:08:50
有必要用农杆菌介导吗？酵母貌似蛮好转化的

我的是野生型的  不是工程菌株   一直都转不出来
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4楼2015-07-28 19:25:33
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潇潇杨雨125

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 枭翔 at 2015-07-28 14:07:08
正着就可以了，大约2d就可以，转化子能够在膜上生长

我转了几次 膜上都没有克隆 倒是周围灭有膜的部分有单克隆 我还以为在膜上不能生长呢
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5楼2015-07-28 19:27:24
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Neo2000

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 潇潇杨雨125 at 2015-07-28 19:25:33
我的是野生型的  不是工程菌株   一直都转不出来...

那也可以考虑做原生质体啊

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6楼2015-07-28 19:58:07
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)
直接电击转化，100%能转化出来

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7楼2015-07-28 21:37:59
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潇潇杨雨125

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-07-28 19:58:07
那也可以考虑做原生质体啊
...

酵母做原生质体是不是很麻烦，我只做过丝状真菌的，酵母原生质体转化效率高吗？

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8楼2015-07-28 22:22:40
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潇潇杨雨125

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by biosci at 2015-07-28 21:37:59
直接电击转化，100%能转化出来

我也用过电转，也是不长，没转质粒的长的挺好的，转了质粒的就是不长😓

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9楼2015-07-28 22:24:07
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
引用回帖:
9楼: Originally posted by 潇潇杨雨125 at 2015-07-28 22:24:07
我也用过电转，也是不长，没转质粒的长的挺好的，转了质粒的就是不长😓
...

没转质粒的长的挺好的？你加了抗生素，没转质粒的肯定不长啊
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10楼2015-07-28 22:29:29
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