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[求助] 农杆菌介导酵母转化已有2人参与

农杆菌介导酵母转化时，第二次转膜是倒扣贴在平板上还是正着，转完后多久揭掉膜？还是在膜上生长？？谢谢

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1楼 2015-07-28 09:39:30

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【答案】应助回帖

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有必要用农杆菌介导吗？酵母貌似蛮好转化的

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2楼2015-07-28 10:08:50

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枭翔

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潇潇杨雨125: 金币+5 2015-07-28 19:26:03

正着就可以了，大约2d就可以，转化子能够在膜上生长

3楼2015-07-28 14:07:08

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2楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-07-28 10:08:50
有必要用农杆菌介导吗？酵母貌似蛮好转化的

我的是野生型的不是工程菌株一直都转不出来

4楼2015-07-28 19:25:33

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3楼: Originally posted by 枭翔 at 2015-07-28 14:07:08
正着就可以了，大约2d就可以，转化子能够在膜上生长

我转了几次膜上都没有克隆倒是周围灭有膜的部分有单克隆我还以为在膜上不能生长呢

5楼2015-07-28 19:27:24

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4楼: Originally posted by 潇潇杨雨125 at 2015-07-28 19:25:33
我的是野生型的不是工程菌株一直都转不出来

...

那也可以考虑做原生质体啊

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6楼2015-07-28 19:58:07

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直接电击转化，100%能转化出来

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7楼2015-07-28 21:37:59

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6楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-07-28 19:58:07
那也可以考虑做原生质体啊
...

酵母做原生质体是不是很麻烦，我只做过丝状真菌的，酵母原生质体转化效率高吗？

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8楼2015-07-28 22:22:40

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7楼: Originally posted by biosci at 2015-07-28 21:37:59
直接电击转化，100%能转化出来

我也用过电转，也是不长，没转质粒的长的挺好的，转了质粒的就是不长😓

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9楼2015-07-28 22:24:07

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biosci

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9楼: Originally posted by 潇潇杨雨125 at 2015-07-28 22:24:07
我也用过电转，也是不长，没转质粒的长的挺好的，转了质粒的就是不长😓
...

没转质粒的长的挺好的？你加了抗生素，没转质粒的肯定不长啊

10楼2015-07-28 22:29:29

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