| 查看: 1560 | 回复: 6 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
求助，关于玉米原生质体转化后的浓度问题 已有1人参与
|
||
|
各位虫友，本虫最近在用玉米的原生质体做亚细胞定位的实验。按照sheen lab的方法，做了10次左右，只成功过一次。遇到的问题如下： 已经成功提取到了健康的原生质体，500ul MMg重悬后在10X的物镜下大约有200-300个原生质体。然后取100ul加10ug质粒、110ul PEG转化，转化完毕用450ul W5溶液终止反应，之后离心去除PEG。再转移到6孔板上，用1ml W5暗培养。8h后制片观察。 发现，在10X的物镜下，一张片子几乎看不到几个原生质体。请问这是怎么回事啊？原生质体都破碎了么？ 将1ml转化后的离心去除大部分溶液后，再次制片，这样在10X的物镜下一个视野可以看到4-5个原生质体。 请问各位虫友，是原生质体的浓度太低么？在转化的时候加入的原生质体应该有很多吧，是都破碎了么？ 急等！谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
江苏省优青门槛
已经有20人回复
-
心好累。今年我们部门提交了18个项目。中了11了，可惜我的又挂了
已经有10人回复
-
植物学论文润色/翻译怎么收费?
已经有259人回复
-
面上项目计划书
已经有7人回复
-
面上项目计划书附件
已经有9人回复
-
面上项目计划书系统状态
已经有18人回复
-
NSFC-UNEP（与联合国环境规划署）合作项目
已经有33人回复
-
和伊朗人合作
已经有32人回复
-
江苏省自然基金
已经有8人回复
-
生命科学新英文普刊《INVESTIGATION OF LIFE SCIENCE》
已经有11人回复
6楼2016-01-30 11:27:34
2楼2015-08-02 21:54:50
随风飘摇11
木虫 (著名写手)
- 应助: 92 (初中生)
- 金币: 2284.9
- 散金: 606
- 红花: 53
- 帖子: 2249
- 在线: 818.5小时
- 虫号: 1146270
- 注册: 2010-11-14
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
3楼2015-08-03 09:40:01
妙儿2008
新虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1031
- 散金: 40
- 帖子: 350
- 在线: 88.5小时
- 虫号: 2568010
- 注册: 2013-07-27
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
4楼2016-01-12 20:17:44
5