应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 巢式PCR扩增有拖尾现象
61/1返回列表
查看: 1330  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

辛德瑞拉331

新虫 (初入文坛)

[求助] 巢式PCR扩增有拖尾现象 已有2人参与

用巢式PCR扩增，除了模板外，阳性和阴性对照也都出现了拖尾。。。求问一直有拖尾的原因，体系在下面，图片在附件里

25ul 体系：GoTaq 酶12.5
                  前引物 0.5
                  后引物 0.5
                  BSA 0.25
                  DNA 2
                  水 9.75
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : Administrator_2015-07-24_12_时_22_分.tif
    • 2015-07-24 15:39:54, 17.02 M

» 猜你喜欢
1楼 2015-07-24 15:56:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

辛德瑞拉331

新虫 (初入文坛)
补充一下，图里面，最后两个条带 分别是阳性和阴性
赞一下 回复此楼
2楼2015-07-24 16:01:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xrxleisure

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
把PCR产物稀释后再做模板试试，有时候模板浓度太大也会P不出来。
赞一下 回复此楼
3楼2015-07-24 16:54:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

辛德瑞拉331

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xrxleisure at 2015-07-24 16:54:58
把PCR产物稀释后再做模板试试，有时候模板浓度太大也会P不出来。

可能是目的基因含量比较少，之前把p1产物稀释之后再做的，结果连条带都看不见了…
赞一下 回复此楼
4楼2015-07-24 19:24:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

米粒morror

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 辛德瑞拉331 at 2015-07-24 19:24:38
可能是目的基因含量比较少，之前把p1产物稀释之后再做的，结果连条带都看不见了…...

我看到网上别人稀释200倍到500倍作为第二轮的模板，然后我分别做过稀释100、200、500倍，结果还是拖尾现象，没有条带，求指导
赞一下 回复此楼
5楼2015-08-07 16:38:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

对照组也出现了弥散，按照文章上的描述（http://www.detaibio.com/topics/pcr-faq-specific-amplify.html），酶dNTP用多了？循环数过多？
赞一下 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
6楼2015-08-10 11:03:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 辛德瑞拉331 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然面上和省基金B类撒花 +4 花田半亩～白 2026-04-21 4/200 2026-04-22 08:15 by kudofaye
[考博] 华师大读博 +3 xq83 2026-04-22 3/150 2026-04-22 03:56 by 啊哒哒哒叨
[论文投稿] 急需审稿人！！！ +3 陆小果画大饼 2026-04-21 3/150 2026-04-21 23:54 by jzy_123456
[考博] 申博/考博 +4 啃面包的小书虫 2026-04-17 8/400 2026-04-21 16:26 by 啃面包的小书虫
[考研] 295分求调剂 +6 ?要上岸? 2026-04-17 6/300 2026-04-21 08:18 by Equinoxhua
[考研] 一志愿中科大材料与化工，353分还有调剂学校吗 +11 否极泰来2026 2026-04-15 13/650 2026-04-20 22:31 by Equinoxhua
[教师之家] 又一批高校组建人工智能学院 师资行吗 不是骗人吗 +4 yexuqing 2026-04-19 4/200 2026-04-20 14:47 by brantleo
[考研] 337求调剂 +3 jyz04 2026-04-18 3/150 2026-04-20 12:24 by 研可安
[考博] 申博 +3 Xyyx. 2026-04-18 3/150 2026-04-20 10:44 by YuY66
[考研] 求计算机方向调剂 +3 Toffee2 2026-04-16 6/300 2026-04-19 22:37 by ll叶
[考研] 294求调剂 +8 淡然654321 2026-04-17 9/450 2026-04-19 19:51 by Equinoxhua
[考研] 304求调剂 +8 castLight 2026-04-16 8/400 2026-04-19 17:14 by 中豫男
[考研] 求调剂 +10 小聂爱学习 2026-04-16 12/600 2026-04-19 16:51 by 中豫男
[考研] 求调剂 +6 苦命人。。。 2026-04-18 7/350 2026-04-19 16:27 by 中豫男
[考研] 0854求调剂 +23 门路摸摸 2026-04-15 27/1350 2026-04-19 01:59 by 烟雨流涯
[考研] 300求调剂 +12 橙a777 2026-04-15 12/600 2026-04-18 23:51 by 路病情
[考研] 接受任何调剂 +6 也就是栗子 2026-04-17 7/350 2026-04-18 17:20 by 涵竹刘
[考研] 260求调剂 +4 Zyt1314520.. 2026-04-17 5/250 2026-04-18 08:28 by babysonlkd
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭