应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 巢式PCR扩增有拖尾现象
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
61/1返回列表
查看: 1313  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

辛德瑞拉331

新虫 (初入文坛)

[求助] 巢式PCR扩增有拖尾现象 已有2人参与

用巢式PCR扩增，除了模板外，阳性和阴性对照也都出现了拖尾。。。求问一直有拖尾的原因，体系在下面，图片在附件里

25ul 体系：GoTaq 酶12.5
                  前引物 0.5
                  后引物 0.5
                  BSA 0.25
                  DNA 2
                  水 9.75
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : Administrator_2015-07-24_12_时_22_分.tif
    • 2015-07-24 15:39:54, 17.02 M

» 猜你喜欢
1楼 2015-07-24 15:56:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

辛德瑞拉331

新虫 (初入文坛)
补充一下，图里面，最后两个条带 分别是阳性和阴性
赞一下 回复此楼
2楼2015-07-24 16:01:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xrxleisure

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
把PCR产物稀释后再做模板试试，有时候模板浓度太大也会P不出来。
赞一下 回复此楼
3楼2015-07-24 16:54:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

辛德瑞拉331

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xrxleisure at 2015-07-24 16:54:58
把PCR产物稀释后再做模板试试，有时候模板浓度太大也会P不出来。

可能是目的基因含量比较少，之前把p1产物稀释之后再做的，结果连条带都看不见了…
赞一下 回复此楼
4楼2015-07-24 19:24:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

米粒morror

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 辛德瑞拉331 at 2015-07-24 19:24:38
可能是目的基因含量比较少，之前把p1产物稀释之后再做的，结果连条带都看不见了…...

我看到网上别人稀释200倍到500倍作为第二轮的模板，然后我分别做过稀释100、200、500倍，结果还是拖尾现象，没有条带，求指导
赞一下 回复此楼
5楼2015-08-07 16:38:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

对照组也出现了弥散，按照文章上的描述（http://www.detaibio.com/topics/pcr-faq-specific-amplify.html），酶dNTP用多了？循环数过多？
赞一下 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
6楼2015-08-10 11:03:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 辛德瑞拉331 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本科211，293分请求调剂 +7 莲菜就是藕吧 2026-04-03 8/400 2026-04-05 11:41 by arrow8852
[考研] 0703总分331求调剂 +10 ZY-05 2026-04-04 13/650 2026-04-05 11:03 by xiayan13521
[考研] 0703调剂 +11 拾玖壹 2026-04-04 12/600 2026-04-05 10:29 by 果冻大王
[考研] 353求调剂 +10 MayUxw1 2026-04-03 10/500 2026-04-05 09:23 by 无际的草原
[考研] 301求调剂 +12 121. 2026-04-04 12/600 2026-04-05 09:00 by 来看流星雨10
[考研] 285求调剂 +11 哦呦呼o 2026-04-04 11/550 2026-04-05 08:15 by 544594351
[考研] 280求调剂 +3 李rien 2026-04-04 3/150 2026-04-04 23:32 by lqwchd
[考研] 11408 一志愿西电，277分求调剂 +4 zhouzhen654 2026-04-03 4/200 2026-04-04 18:10 by 猪会飞
[考研] 334求调剂 +8 曾仰之 2026-04-03 8/400 2026-04-04 11:16 by w_xuqing
[考研] 265求调剂 +17 林深温澜 2026-04-01 20/1000 2026-04-04 01:09 by userper
[考研] 281求调剂 +10 aaawhy 2026-04-03 10/500 2026-04-03 21:42 by lbsjt
[考研] 310求调剂 +18 争取九点睡 2026-03-30 18/900 2026-04-03 18:35 by ls刘帅
[考研] 285求调剂 +5 AZMK 2026-04-03 8/400 2026-04-03 18:17 by AZMK
[考研] 机械专硕297 +3 Afksy 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:24 by 1753564080
[考研] 复试调剂 +3 bvzz 2026-04-01 3/150 2026-04-03 09:47 by 蓝云思雨
[考研] 材料340分调剂 +7 夏夜晚风_long 2026-04-02 9/450 2026-04-02 21:20 by dongzh2009
[考研] 348求调剂 +11 zzzzyk123 2026-04-01 11/550 2026-04-02 16:52 by Wang200018
[考研] 0703一志愿南师大334求调剂 +4 seven7yu 2026-03-30 4/200 2026-04-01 16:10 by oooqiao
[硕博家园] 考研调剂 +5 骆驼男人 2026-04-01 5/250 2026-04-01 14:28 by syjjj0321
[考研] 083000环境科学与工程调剂，总分281 +4 橙子（胜意） 2026-03-30 4/200 2026-03-31 00:44 by Linzejun
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭