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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 小白手提质粒出现了问题，求高手看看
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wuwuqaz

木虫 (正式写手)

[求助] 小白手提质粒出现了问题，求高手看看 已有1人参与

最近在手提质粒，但是提出来的是这样的。其中最右边的那个条带是别人的。marker 右边第一第三，是我加入solution III后离心沉淀将上清液加到了试剂盒的那个吸附膜上，后面操作步骤和试剂盒提取是一样的。而第二第四使用的是自己用酒精沉淀。点的marker是15k的，因为2000的marker没有了。然后质粒大小是大于5000bp。现在的问题是那个弥撒状的是不是RNA？我没有加RNase。还有就是为啥提不出来质粒DNA。。
我使用的是碱裂解法：溶液Ｉ
50mmol/L葡萄糖
25mmol/L Tris．Cl(pH8.0)
10mmol/LEDTA(pH8.0)
溶液Ⅱ
0.2mol/L NaOH（临用前用10mol/L贮存液现用现稀释）
1%SDS
溶液Ⅲ
5mol/Ｌ乙酸钾 60ml
冰乙酸 11.5ml
水 28.5ml
求高手帮一把，小弟在这里先谢过各位啦~

小白手提质粒出现了问题，求高手看看
PLASMID 3.jpg
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1楼 2015-07-24 11:55:48
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yorkwallace

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
wuwuqaz: 金币+30, ★★★很有帮助, 我才知道怎么给金币=_= 2015-11-17 14:00:17
首先表扬你都现在你还会自己配质粒提取液，现在已经好多人都不会配了。对你猜对了是因为你没加RNAase出现弥散带，但是主要问题应该是你提质粒时太剧烈了，下次反复颠倒时轻柔一点
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2楼2015-10-20 18:05:10
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wuwuqaz

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yorkwallace at 2015-10-20 18:05:10
首先表扬你都现在你还会自己配质粒提取液，现在已经好多人都不会配了。对你猜对了是因为你没加RNAase出现弥散带，但是主要问题应该是你提质粒时太剧烈了，下次反复颠倒时轻柔一点

谢谢，我已经找到原因了

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3楼2015-10-21 19:27:23
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谦虚求解

铜虫 (小有名气)
不知道楼主是否方便告知一下，您是如何解决该问题的，期待您的答复

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4楼2020-09-14 14:49:46
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