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wuwuqaz

木虫 (正式写手)

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[求助] 小白手提质粒出现了问题，求高手看看已有1人参与

最近在手提质粒，但是提出来的是这样的。其中最右边的那个条带是别人的。marker 右边第一第三，是我加入solution III后离心沉淀将上清液加到了试剂盒的那个吸附膜上，后面操作步骤和试剂盒提取是一样的。而第二第四使用的是自己用酒精沉淀。点的marker是15k的，因为2000的marker没有了

。然后质粒大小是大于5000bp。现在的问题是那个弥撒状的是不是RNA？我没有加RNase。还有就是为啥提不出来质粒DNA。。
我使用的是碱裂解法：溶液Ｉ
50mmol/L葡萄糖
25mmol/L Tris．Cl(pH8.0)
10mmol/LEDTA(pH8.0)
溶液Ⅱ
0.2mol/L NaOH（临用前用10mol/L贮存液现用现稀释）
1%SDS
溶液Ⅲ
5mol/Ｌ乙酸钾 60ml
冰乙酸 11.5ml
水 28.5ml
求高手帮一把

，小弟在这里先谢过各位啦~

PLASMID 3.jpg

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1楼 2015-07-24 11:55:48

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wuwuqaz

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引用回帖:

2楼: Originally posted by yorkwallace at 2015-10-20 18:05:10
首先表扬你都现在你还会自己配质粒提取液，现在已经好多人都不会配了。对你猜对了是因为你没加RNAase出现弥散带，但是主要问题应该是你提质粒时太剧烈了，下次反复颠倒时轻柔一点

谢谢，我已经找到原因了

发自小木虫IOS客户端