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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 急求 荧光定量PCR的问题
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ihongling

新虫 (初入文坛)

[求助] 急求 荧光定量PCR的问题 已有1人参与

我最近做荧光定量PCR遇到一些问题，希望能得到大侠们的帮助。我相同的条件昨天做的目的基因的溶解曲线很好，但是今天就重复不出来了，不知道什么原因，稀释模版也尝试了，引物也换过了 ，很苦恼！！
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1楼 2015-07-24 08:33:43
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ihongling

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 墨尔本机器 at 2015-07-24 09:26:11
模板中如果目的基因含量太低，回导致杂峰的出现。

那是需要调高模版浓度吗？我是有时候能做出来有时候做不出来，然后内参和目的基因从来没有一起做出来过
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3楼2015-07-24 10:06:15
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墨尔本机器

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
ihongling(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-24 10:20:03
模板中如果目的基因含量太低，回导致杂峰的出现。
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2楼2015-07-24 09:26:11
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fay0427

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ihongling at 2015-07-24 10:06:15
那是需要调高模版浓度吗？我是有时候能做出来有时候做不出来，然后内参和目的基因从来没有一起做出来过...

内参和目的基因不能同时做出来会不会是你的内参选择不合适呀？也就是丰度与目的基因相差太多，你觉得呢？
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加油！
4楼2015-07-24 10:56:31
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