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低拷贝基因,如何做荧光定量PCR?
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| 近来,荧光定量实验出了问题,目的基因的的三个复孔的平行性很差,内参基因的平行性很好。之前一直以为是反转录没做好,后来经过一番排查,RNA提取,DNA酶消化,反转,引物都没有问题。因为凡是cp值在不超过28的基因的平行性都非常好,而我的基因的平行性超过了30,平行性就非常的不好。后来验证了一些别的低拷贝的基因,也是平行性非常不好。所以我想问问大家低拷贝的基因如何做荧光定量啊?急求,各位同胞! |
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