| 查看: 1375 | 回复: 5 | ||
guaidiandian新虫 (小有名气)
|
[求助]
请问原位杂交的DNA模板怎么制备 已有1人参与
|
|
1 原位杂交的引物怎么设计，有啥要求？ 2 原位杂交的DNA模板有没有长度限制？ 3 做DNA模板时还有什么需要注意的地方？ 要是能把做原位杂交DNA模板的全部过程写出来将不胜感激~~~ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有115人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
jiqinger
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 88 (初中生)
- 金币: 5179.6
- 红花: 16
- 帖子: 745
- 在线: 165.7小时
- 虫号: 1679784
- 注册: 2012-03-10
- 性别: GG
- 专业: 化学环境污染与健康
2楼2015-07-21 21:15:25
guaidiandian
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 14.8
- 散金: 22
- 红花: 1
- 帖子: 63
- 在线: 17.6小时
- 虫号: 3524610
- 注册: 2014-11-07
- 专业: 细胞生物学
3楼2015-07-21 21:26:08
jiqinger
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 88 (初中生)
- 金币: 5179.6
- 红花: 16
- 帖子: 745
- 在线: 165.7小时
- 虫号: 1679784
- 注册: 2012-03-10
- 性别: GG
- 专业: 化学环境污染与健康
4楼2015-07-22 08:29:33
guaidiandian
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 14.8
- 散金: 22
- 红花: 1
- 帖子: 63
- 在线: 17.6小时
- 虫号: 3524610
- 注册: 2014-11-07
- 专业: 细胞生物学
|
不好意思我还不太明白，设计引物只用在5‘端加上酶切位点吗？ 我写下详细过程您看对不对，因为第一次做也不是很明白！  1 用目的基因的特征序列设计引物，在上下游引物的5’端分别加上两个不同的载体上有的酶切位点。（问题：这个过程对限制性内切酶有什么要求吗？可以从质粒中直接扩增出所需要的那一部分序列么？） 2 将扩增出的片段和载体直接用酶进行酶切，载体是pSPT18和pSPT19，然后用T4DNA连接酶进行连接，然后转化DH5α大肠杆菌，用amp进行筛选。 3 将成功导入的菌落进行扩增然后提取重组质粒，用载体上的酶切位点将质粒线性化（用能产生5‘突出端的酶进行酶切），产生出制备RNA探针的模板。 这个过程对吗？求指教！  |
5楼2015-07-22 11:20:35
jiqinger
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 88 (初中生)
- 金币: 5179.6
- 红花: 16
- 帖子: 745
- 在线: 165.7小时
- 虫号: 1679784
- 注册: 2012-03-10
- 性别: GG
- 专业: 化学环境污染与健康
6楼2015-07-22 13:12:26