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如何在载体上加纯化标签
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99蜗牛99
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如何在载体上加纯化标签
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急!!!前辈们,新虫求助,我想在要表达的蛋白上加上纯化标签,但之前选的载体上没有,还可以直接在载体上加吗,加在N端还是C端表达量多呀?
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1楼
2015-07-21 09:00:04
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99蜗牛99
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3楼
:
Originally posted by
uulovelyuu
at 2015-07-21 09:18:15
1. 加标签没问题,要自己选定合适的标签,如GST,His,MBP。。。。。
2。N端C端效果不好说,要自己尝试。一般从N端试起,或者同时做两个克隆。
3。如果表达载体上没有标签,要么换载体,如果是His标签,可以设计在 ...
您好,请问如果加在C端的话,标签是要放在目的基因3‘端与终止子之间的位置吗?
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6楼
2015-07-21 09:34:27
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★
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不太明白你的意思,你做的是原核
蛋白表达纯化
么?你要加什么标签?His么?标签是要加在目的基因上的,这样纯化才有效果,目的基因<50kd可加N端,>50kd加C端。
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2楼
2015-07-21 09:14:42
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专业: 生物大分子结构与功能
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1. 加标签没问题,要自己选定合适的标签,如GST,His,MBP。。。。。
2。N端C端效果不好说,要自己尝试。一般从N端试起,或者同时做两个克隆。
3。如果表达载体上没有标签,要么换载体,如果是His标签,可以设计在引物上,注意对框。
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3楼
2015-07-21 09:18:15
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2楼
:
Originally posted by
恶魔的左眼
at 2015-07-21 09:14:42
不太明白你的意思,你做的是原核蛋白表达纯化么?你要加什么标签?His么?标签是要加在目的基因上的,这样纯化才有效果,目的基因<50kd可加N端,>50kd加C端。...
蛋白是要在酵母中表达的,现在想加His标签,目的基因长度在1100bp左右,谢谢您。。。
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4楼
2015-07-21 09:24:23
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