应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 超表达载体构建之前克隆基因 测序序列总是与原序列不一样
101/1返回列表
查看: 1967  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

晓颗

新虫 (初入文坛)

[求助] 超表达载体构建之前克隆基因 测序序列总是与原序列不一样 已有2人参与

要做载体构建，但是测了好多次序都与原序列不同，同一个培养板上挑菌的序列也不同！！！不过有两个序列的氨基酸序列与原序列相同，这样的话能继续往下做么，已经快做3个月了 再做不出来实验要来不及了。。。。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-07-17 17:30:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晓颗

新虫 (初入文坛)
没有人 自己顶
回复此楼
2楼2015-07-18 09:46:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晓颗

新虫 (初入文坛)
有没有大神帮帮忙呀~~~~
赞一下 回复此楼
3楼2015-07-18 09:46:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

great07225388

新虫 (著名写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-20 22:50:41
引用回帖:
3楼: Originally posted by 晓颗 at 2015-07-18 09:46:31
有没有大神帮帮忙呀~~~~

可能的原因太多。感受态污染？抗性平板污染？等等，建议重新准备这些材料，重做一遍。连载体，转化这些还是比较容易的实验，出问题了好好思考下原因。祝实验成功！

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-07-19 10:58:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晓颗

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by great07225388 at 2015-07-19 10:58:23
可能的原因太多。感受态污染？抗性平板污染？等等，建议重新准备这些材料，重做一遍。连载体，转化这些还是比较容易的实验，出问题了好好思考下原因。祝实验成功！
...

都重新准备过 为什么测序就是不对呢？最想知道的就是使用氨基酸序列相同单核苷酸序列不同（是指和原序列相比）的可不可以继续往下做载体构建，最后转入植物进行表达
赞一下 回复此楼
5楼2015-07-20 15:08:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

吾小豆123

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-20 22:50:59
可能NCBI提交的序列和你的序列刚好存在某些位点的SNP。换几种保真性高的酶继续扩，如果还是相同的结果就继续往下做吧。
赞一下 回复此楼
6楼2015-07-20 21:42:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dehong1573

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

序列不同是什么意思，点突变？还是完全不一样？如果是点突变很可能是PCR时导致的，如果氨基酸序列没有突变，也就是同意突变，就可以不管，继续很下做
赞一下 回复此楼
科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
7楼2015-07-21 10:25:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晓颗

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by dehong1573 at 2015-07-21 10:25:19
序列不同是什么意思，点突变？还是完全不一样？如果是点突变很可能是PCR时导致的，如果氨基酸序列没有突变，也就是同意突变，就可以不管，继续很下做

就是有的碱基和原来的不一样，但翻译出来的氨基酸序列是一样的，不过我是要把基因导入表达载体做超表达和抑制表达，这样也可以继续往下做吗？
赞一下 回复此楼
8楼2015-07-21 21:06:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dehong1573

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 晓颗 at 2015-07-21 21:06:40
就是有的碱基和原来的不一样，但翻译出来的氨基酸序列是一样的，不过我是要把基因导入表达载体做超表达和抑制表达，这样也可以继续往下做吗？...

可以，没问题的
回复此楼
科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
9楼2015-07-22 08:13:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晓颗

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by dehong1573 at 2015-07-22 08:13:34
可以，没问题的...

感谢！
回复此楼
10楼2015-07-22 09:57:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 晓颗 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 289求调剂 +15 硕星赴 2026-03-23 15/750 2026-03-26 02:16 by BruceLiu320
[考研] 求调剂 +3 芦lty 2026-03-25 4/200 2026-03-25 23:25 by 芦lty
[考研] 299求调剂 +7 某某某某位 2026-03-21 8/400 2026-03-25 20:34 by 热情沙漠
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +3 小鱼爱有机 2026-03-25 3/150 2026-03-25 20:13 by qingfeng258
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 材料学硕333求调剂 +4 北道巷 2026-03-24 4/200 2026-03-25 14:16 by mapenggao
[考研] 287求调剂 +10 晨昏线与星海 2026-03-19 11/550 2026-03-25 10:35 by userper
[考研] 0703化学调剂，求导师收 +7 天天好运来上岸� 2026-03-24 7/350 2026-03-24 20:26 by peike
[考研] 求调剂 +5 林之夕 2026-03-24 5/250 2026-03-24 17:16 by dick_runner
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +18 chaojifeixia 2026-03-19 20/1000 2026-03-24 10:34 by dolphin_ycj
[考研] 291求调剂 +8 hhhhxn.. 2026-03-23 8/400 2026-03-23 23:15 by peike
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭