| 查看: 2028 | 回复: 34 | |||
[交流]
免疫组化片子有污染物，求助
|
|||
|
本人近期做免疫组化实验，做人的片子在显色之后总是有污染物，内源性过氧化物酶使用双氧水灭活，封闭使用5%的BSA。每步都有PBS清洗，洗完之后再用清水洗一遍。在同一批实验中只有人的有这个污染物，也不是每张人的片子都有，实在是想不通原因，来这里求助大神。 实验步骤简单的描述下：1，切片，烤片60℃，1-2h； 2，脱蜡及复水 二甲苯10min，100％乙醇10min，95％乙醇10min，90％乙醇10min，85％乙醇10min，80％乙醇10min， 75％乙醇10min，纯水10分钟， 3.微波修复 将切片浸入0.01M枸橼酸缓冲液，微波中最大火力（98℃-100℃）加热至沸腾，冷却（约5-10min），反复两次； 4.将切片自然冷却至室温，PBS洗涤3次，每次5min； 5.封闭，5％BSA，室温20min，甩去多余液体； 6.滴加一抗，37℃，1h，或者4℃过夜； 7.PBS洗涤3次，每次3min； 8.滴加二抗，4℃，60min； 9.PBS洗涤3次，每次5min； 10.DAB显色剂配置好后，滴加于切片，室温，镜下检测反应时间（约5min）； 11.自来水冲洗干净，过蒸馏水； 12.苏木素复染2min，自来水冲洗； 13.脱水 70％乙醇10min，80％乙醇10min，90％乙醇10min，95％乙醇10min，100％乙醇10min，二甲苯30min； 14.树胶封片，镜检。  肾 (2).jpg  污染物 (2).jpg  污染物.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B?
已经有5人回复
-
职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊
已经有4人回复
-
奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样
已经有10人回复
-
应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键
已经有30人回复
-
综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？
已经有13人回复
-
是这周出结果还是下周出结果？
已经有3人回复
-
小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊
已经有9人回复
-
有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验）
已经有4人回复
-
帮忙看看fileCode
已经有13人回复
-
为什么网上很多人说本周 12号出结果
已经有7人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
北京理工大学集成电路学院-柔性电子器件与智造研究所-2027级博士招生
+1/468
-
上海男征女 条件优秀可加微信联系
+1/452
-
发榜前的“心理过山车”：你经历了吗？
+5/190
-
物理学报录用，散币感谢合作者和审稿人
+2/86
-
招收本科/研究生实习生（2026年9月开始可以长期实习）
+1/81
-
新人投稿arxiv 需要cs.IT/CR大佬背书
+1/68
-
广东医科大学博士后招聘-基础医学，生信等方向
+1/41
-
【坐标北京，诚征男友，结婚对象】
+5/32
-
请问谁有2025最新影响因子Excel表？金币求助！
+1/27
-
哈工大（深圳）何自开团队诚招2027级化学工程与技术专业博士生
+1/26
-
南京航空航天大学招收27年力学硕士和博士生研究生
+1/14
-
浙江大学医学院附属第一医院招聘科研助理
+1/11
-
澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生（3个名额）地质化工冶金领域
+1/9
-
澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生（3个名额）地质化工冶金领域
+1/9
-
深圳理工大学招收生物医用高分子材料方向客座研究生
+1/6
-
中山大学计算数学方向招2027届考核制博士生
+1/3
-
夏尽秋来，蓄力沉淀，静待硕果成文
+1/2
-
苏州大学能源学院管大秦课题组诚聘博士后及招收博士/硕士研究生
+1/2
-
中国科学技术大学环境学院招聘招生
+1/2
-
我需要知道比open science或者claude science更牛的科研学术论文工具
+1/1
33楼2015-07-17 16:35:24
7楼2015-07-17 15:12:42
34楼2015-07-17 17:32:25
35楼2016-03-21 16:31:49
简单回复
dmbb2楼
2015-07-17 14:57
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
xiejf3楼
2015-07-17 15:06
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
一
xiejf4楼
2015-07-17 15:06
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
假大空5楼
2015-07-17 15:06
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
xiejf6楼
2015-07-17 15:06
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
ylheping8楼
2015-07-17 15:16
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
ylheping9楼
2015-07-17 15:17
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
ylheping10楼
2015-07-17 15:17
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
h74111楼
2015-07-17 15:24
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
1
h74112楼
2015-07-17 15:24
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
1
h74113楼
2015-07-17 15:25
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
1
neu23414楼
2015-07-17 15:26
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
neu23415楼
2015-07-17 15:26
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
neu23416楼
2015-07-17 15:26
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
laom201317楼
2015-07-17 15:29
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
laom201318楼
2015-07-17 15:29
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
laom201319楼
2015-07-17 15:29
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
hydzp20楼
2015-07-17 15:32
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
于士辉21楼
2015-07-17 15:35
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
1
于士辉22楼
2015-07-17 15:35
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
2
于士辉23楼
2015-07-17 15:35
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
3
茶米24楼
2015-07-17 15:42
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
mmmmm凝萱25楼
2015-07-17 15:42
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
mmmmm凝萱26楼
2015-07-17 15:42
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
mmmmm凝萱27楼
2015-07-17 15:43
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
茶米28楼
2015-07-17 15:43
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
shenrenren29楼
2015-07-17 16:01
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
pyy19850030楼
2015-07-17 16:19
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
pyy19850031楼
2015-07-17 16:20
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
pyy19850032楼
2015-07-17 16:20
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
