| 查看: 1866 | 回复: 34 | |||
[交流]
免疫组化片子有污染物，求助
|
|||
|
本人近期做免疫组化实验，做人的片子在显色之后总是有污染物，内源性过氧化物酶使用双氧水灭活，封闭使用5%的BSA。每步都有PBS清洗，洗完之后再用清水洗一遍。在同一批实验中只有人的有这个污染物，也不是每张人的片子都有，实在是想不通原因，来这里求助大神。 实验步骤简单的描述下：1，切片，烤片60℃，1-2h； 2，脱蜡及复水 二甲苯10min，100％乙醇10min，95％乙醇10min，90％乙醇10min，85％乙醇10min，80％乙醇10min， 75％乙醇10min，纯水10分钟， 3.微波修复 将切片浸入0.01M枸橼酸缓冲液，微波中最大火力（98℃-100℃）加热至沸腾，冷却（约5-10min），反复两次； 4.将切片自然冷却至室温，PBS洗涤3次，每次5min； 5.封闭，5％BSA，室温20min，甩去多余液体； 6.滴加一抗，37℃，1h，或者4℃过夜； 7.PBS洗涤3次，每次3min； 8.滴加二抗，4℃，60min； 9.PBS洗涤3次，每次5min； 10.DAB显色剂配置好后，滴加于切片，室温，镜下检测反应时间（约5min）； 11.自来水冲洗干净，过蒸馏水； 12.苏木素复染2min，自来水冲洗； 13.脱水 70％乙醇10min，80％乙醇10min，90％乙醇10min，95％乙醇10min，100％乙醇10min，二甲苯30min； 14.树胶封片，镜检。  肾 (2).jpg  污染物 (2).jpg  污染物.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
情人节自我反思：在爱情中有过遗憾吗？
已经有4人回复
-
球磨粉体时遇到了大的问题，请指教！
已经有12人回复
-
江汉大学解明教授课题组招博士研究生/博士后
已经有3人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
医学超声影像负责人招聘-中国科学院赣江创新研究院
+1/975
-
西湖大学2026年秋季入学物理学、光学、电子信息方向博士生有名额速来！！！
+2/236
-
西湖大学2026年秋季入学物理学、光学、电子信息方向博士生有名额速来！！！
+2/224
-
大连海事大学轮机学院博士名额1个
+1/181
-
澳洲西澳大学Dr Yiran Liu招全额奖学金和CSC奖学金博士生（3.8万澳币/年）
+1/101
-
贺电中定位于“积极作用”，是不是对基金委工作不够满意？
+1/79
-
一个陌生女人的来信
+1/78
-
上海交通大学-宁波东方理工大学联合培养博士生
+1/15
-
香港中文大学（深圳）陈筱萌 课题组招生公告（博士 / 博后 / 硕士 / RA）
+1/13
-
香港城市大学范俊教授招博士生 2名 机器学习和仿真设计新的电池材料 仅限C9高校学生
+1/13
-
湖南大学-分析检测技术和生物柔性传感器-招收1名博士研究生 (2026年，第二批)
+1/12
-
【青岛大学】2026年生物与医药申请考核制博士生招生（含少数民族骨干人才）
+1/10
-
中科院深圳先进技术研究院招联培学生 -- 多中心大队列数据已就绪，助你快车道产出成果
+1/9
-
代教授（南昌航空大学）招收CO2光&光热催化还原方向的博士生
+1/8
-
上海工程技术大学张培磊教授团队招收博士生
+1/7
-
上海大学生物有机电子材料及器件团队博士研究生招聘
+1/7
-
澳科大招收2026年秋季药物递送/生物材料方向硕士研究生（3月5日18:00报名截止）
+1/6
-
墨尔本大学(QS13)急招CSC博士(补齐全奖)/访问学者/博士后 (材料/生物医学/器官芯片等)
+1/5
-
国内树枝状聚合物现在进入量产了吗？
+1/3
-
斯德哥尔摩 DigitalFuture 博士后奖学金机会！
+1/1
33楼2015-07-17 16:35:24
7楼2015-07-17 15:12:42
34楼2015-07-17 17:32:25
35楼2016-03-21 16:31:49
简单回复
dmbb2楼
2015-07-17 14:57
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
xiejf3楼
2015-07-17 15:06
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
一
xiejf4楼
2015-07-17 15:06
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
假大空5楼
2015-07-17 15:06
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
xiejf6楼
2015-07-17 15:06
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
ylheping8楼
2015-07-17 15:16
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
ylheping9楼
2015-07-17 15:17
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
ylheping10楼
2015-07-17 15:17
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
h74111楼
2015-07-17 15:24
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
1
h74112楼
2015-07-17 15:24
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
1
h74113楼
2015-07-17 15:25
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
1
neu23414楼
2015-07-17 15:26
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
neu23415楼
2015-07-17 15:26
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
neu23416楼
2015-07-17 15:26
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
laom201317楼
2015-07-17 15:29
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
laom201318楼
2015-07-17 15:29
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
laom201319楼
2015-07-17 15:29
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
hydzp20楼
2015-07-17 15:32
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
于士辉21楼
2015-07-17 15:35
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
1
于士辉22楼
2015-07-17 15:35
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
2
于士辉23楼
2015-07-17 15:35
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
3
茶米24楼
2015-07-17 15:42
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
mmmmm凝萱25楼
2015-07-17 15:42
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
mmmmm凝萱26楼
2015-07-17 15:42
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
mmmmm凝萱27楼
2015-07-17 15:43
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
茶米28楼
2015-07-17 15:43
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
shenrenren29楼
2015-07-17 16:01
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
pyy19850030楼
2015-07-17 16:19
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
pyy19850031楼
2015-07-17 16:20
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与
pyy19850032楼
2015-07-17 16:20
回复
liandongqq(金币+1): 谢谢参与