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ls200000

新虫 (初入文坛)

[交流] 琼脂糖电泳问题 已有13人参与

跑了半个月琼脂糖电泳,一直跑不好。

如图:
4个孔都是DNA Mark,全部都是弥散的。最亮的地方是前沿指示剂的位置。换了电泳缓冲液、Mark、电泳槽、电压、水(超市买的屈臣氏蒸馏水)等等,问题依旧。电泳条件:胶浓度1%,电压100v,电泳时间30分钟。

感觉唯一没换的是电泳仪了,难道是电泳仪(已经闲置了5年的电泳仪啊)的问题,请各位大神指教啊!

琼脂糖电泳问题
IMAG0365.jpg
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yufeiwaner

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-07-16 14:49:50
电泳出问题最多的是胶没制好,一定要把琼脂糖彻底微波融化才行。我实验室一般90-110V,时间28-35min,新鲜的电泳缓冲液电流约60-100mA,长期不换则高达120mA。都没问题的。
楼主不如找个同学帮你做一次,或者去别的实验室做一次,很容易就找到原因了!
6楼2015-07-16 09:29:41
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查看全部 18 个回答

zhqingfang

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
跑DNA,胶的浓度太低,换成1.8%,即100毫升加1.8克琼脂糖,1%只能跑RNA
实验忙碌中
2楼2015-07-15 15:59:03
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祭月江陵

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
电压高了,换70~80。时间长点无所谓

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2015-07-15 17:06:33
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haze12344

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-16 14:49:28
感觉实验条件都可以啊,考虑一下是不是配缓冲液的试剂有问题或者稀释有问题,再就是煮胶
生物你好
5楼2015-07-16 08:07:48
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