24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1947  |  回复: 17

ls200000

新虫 (初入文坛)

[交流] 琼脂糖电泳问题 已有13人参与

跑了半个月琼脂糖电泳,一直跑不好。

如图:
4个孔都是DNA Mark,全部都是弥散的。最亮的地方是前沿指示剂的位置。换了电泳缓冲液、Mark、电泳槽、电压、水(超市买的屈臣氏蒸馏水)等等,问题依旧。电泳条件:胶浓度1%,电压100v,电泳时间30分钟。

感觉唯一没换的是电泳仪了,难道是电泳仪(已经闲置了5年的电泳仪啊)的问题,请各位大神指教啊!

琼脂糖电泳问题
IMAG0365.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yufeiwaner

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-07-16 14:49:50
电泳出问题最多的是胶没制好,一定要把琼脂糖彻底微波融化才行。我实验室一般90-110V,时间28-35min,新鲜的电泳缓冲液电流约60-100mA,长期不换则高达120mA。都没问题的。
楼主不如找个同学帮你做一次,或者去别的实验室做一次,很容易就找到原因了!
6楼2015-07-16 09:29:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhqingfang

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
跑DNA,胶的浓度太低,换成1.8%,即100毫升加1.8克琼脂糖,1%只能跑RNA
实验忙碌中
2楼2015-07-15 15:59:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

试试90V   30min
3楼2015-07-15 16:46:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

祭月江陵

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
电压高了,换70~80。时间长点无所谓

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2015-07-15 17:06:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haze12344

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-16 14:49:28
感觉实验条件都可以啊,考虑一下是不是配缓冲液的试剂有问题或者稀释有问题,再就是煮胶
生物你好
5楼2015-07-16 08:07:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ls200000

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhqingfang at 2015-07-15 15:59:03
跑DNA,胶的浓度太低,换成1.8%,即100毫升加1.8克琼脂糖,1%只能跑RNA

谢谢,今天下午1.8%试试看
7楼2015-07-16 10:23:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ls200000

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by yufeiwaner at 2015-07-16 09:29:41
电泳出问题最多的是胶没制好,一定要把琼脂糖彻底微波融化才行。我实验室一般90-110V,时间28-35min,新鲜的电泳缓冲液电流约60-100mA,长期不换则高达120mA。都没问题的。
楼主不如找个同学帮你做一次,或者去别的 ...

我是在电炉上煮,看胶已经澄清,煮开就断火,难道煮的时间短了?我下午再煮时间长点试试看吧。谢谢
8楼2015-07-16 10:27:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangyx0411702

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-16 14:50:15
可能是琼脂糖没有完全溶化。在微波炉里,都要开好几次才能好,电炉煮开就关,估计是没有完全溶化的缘故。完全好时,对着光看,非常澄清透亮,没有小颗粒。
9楼2015-07-16 11:27:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhqingfang

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by ls200000 at 2015-07-16 10:23:15
谢谢,今天下午1.8%试试看...

不谢,祝你顺利
实验忙碌中
10楼2015-07-16 17:17:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ls200000 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 揭秘青基评审内幕:几个A才能顺利中标 +3 国自然国社科中 2026-05-23 4/200 2026-05-23 15:37 by 2000zf36392
[论文投稿] 投MDPI的三个期刊都被桌拒 +4 木虫研究牲 2026-05-17 5/250 2026-05-23 14:44 by 期刊投稿求助
[考博] 26/27申博自荐 10+4 ZXW0202 2026-05-22 6/300 2026-05-23 14:32 by tfang
[基金申请] 河北省自然科学基金 +5 Peterchao 2026-05-18 6/300 2026-05-23 13:28 by Peterchao
[基金申请] 青B发送上会通知了吗 +5 chemBioBro 2026-05-22 7/350 2026-05-23 12:35 by zhuifengzhy
[考博] 博士申请 +3 焦晓明 2026-05-21 3/150 2026-05-23 11:26 by mlc840311
[基金申请] 今年审到国自然15份,谈谈感受 +27 国自然国社科中 2026-05-17 28/1400 2026-05-22 16:25 by hunter无悔
[论文投稿] 投稿求助,期刊 +4 希冀,有书读 2026-05-20 8/400 2026-05-22 10:16 by 希冀,有书读
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 13/650 2026-05-21 20:15 by 呀呀好傻
[基金申请] 面上本子正文33页,违规吗?会被低分嘛? +14 1234567wang 2026-05-17 16/800 2026-05-21 17:58 by 脆脆的饼干
[基金申请] 国自然评分 +4 无名者登山 2026-05-20 5/250 2026-05-21 16:35 by swuq
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +9 fummck 2026-05-20 10/500 2026-05-21 14:17 by draco1987
[基金申请] 评审有感 +15 popular289 2026-05-18 26/1300 2026-05-21 10:35 by 西葫芦炒鸡蛋
[论文投稿] Sci. Bull. 悲剧经验 +7 jyang1999 2026-05-16 8/400 2026-05-21 08:50 by 能丫
[考博] 云南大学材料与能源学院解琳课题组钙钛矿博士招生 +4 光伏爱好者 2026-05-17 6/300 2026-05-21 01:37 by 17520222914
[有机交流] 反应很差,大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[考博] 如果工作了想读博,可以边工作边读全日制嘛? 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
[硕博家园] 我在等一个没有答案的答案 +3 Love_MH 2026-05-17 3/150 2026-05-18 02:22 by 竹林孤影
信息提示
请填处理意见