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日记布

金虫 (正式写手)

[求助] HPLC换流动相后标准品出现双峰!!小白求助!!! 已有10人参与

NJ1(1)是我的菌体发酵液甲醇浓缩的,甲醇60:水59.95:甲酸0.05标准品什么的都正常,锋行也不错就是出风太靠前了,所以觉得应该减少甲醇的比例,之后几个图片就是把甲醇比例减少10个体积,(以下几个图片就是甲醇50,甲醇40,甲醇30)这样问题就来了,标准品出现了双峰!!重新配过也这样,我觉得我操作也还行啊,不至于污染啊,要是污染样品都是在同一条件下,没出风啊,我的标准品是咖啡酸,龙胆酸,原儿茶酸,都出现双峰,急死了不知道怎么办了!!!

HPLC换流动相后标准品出现双峰!!小白求助!!!
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HPLC换流动相后标准品出现双峰!!小白求助!!!-1
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HPLC换流动相后标准品出现双峰!!小白求助!!!-2
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HPLC换流动相后标准品出现双峰!!小白求助!!!-3
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

用什么方法前处理的
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
2楼2015-07-11 09:49:30
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foodsnew

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
标准品是用流动相溶解的吗,可能是溶剂引起的
4楼2015-07-11 10:42:58
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xuchao7447

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
标准品保留时间太短了,建议延长保留时间!!!
生活就是如此
9楼2015-07-13 08:00:07
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sw.p.ing

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
换个溶剂试试,不要用纯甲醇
11楼2015-07-13 09:31:48
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sunj198611

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我以前也跟你遇到过类似情况。最有可能的原因是柱子的问题。
我当时换个根柱子就OK了。
建议1:清洗色谱柱,有针对性的清洗色谱柱;
2. 实验室有条件的话,可以申请重新买根柱子。
13楼2015-07-13 16:37:03
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songbingna

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是不是标准品降解了??或者做之前把针洗一下我之前遇到这样的,

[ 发自小木虫客户端 ]
comeonbaby
15楼2015-07-13 22:30:29
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lisq0762

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by archbishop at 2015-07-11 05:50:03
还有空白做了吗

正常情况下, 色谱条件和培养过程没有问题的话,如果都是双峰,考虑可能色谱柱损坏,柱头塌陷。可以将色谱柱倒过来使用进一针看看谱图效果怎么样。要是不出现双峰,就是色谱柱的问题。
人生命运永远掌握在自己手中
18楼2015-07-14 07:08:31
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

引用回帖:
18楼: Originally posted by lisq0762 at 2015-07-14 07:08:31
正常情况下, 色谱条件和培养过程没有问题的话,如果都是双峰,考虑可能色谱柱损坏,柱头塌陷。可以将色谱柱倒过来使用进一针看看谱图效果怎么样。要是不出现双峰,就是色谱柱的问题。...

你说的很有道理,可能我们考虑问题的角度不同,我认为甲醇比例较高并且是等度,可能有没分开的峰,以及是用紫外做检测器,专属性较差,尤其这种成分复杂的样品,单靠波长和保留时间难以定性。
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
21楼2015-07-14 11:04:12
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普通回帖

archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

还有空白做了吗
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
3楼2015-07-11 09:50:03
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日记布

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by foodsnew at 2015-07-11 10:42:58
标准品是用流动相溶解的吗,可能是溶剂引起的

标准品用甲醇啊
5楼2015-07-11 22:32:44
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日记布

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by archbishop at 2015-07-11 09:50:03
还有空白做了吗

没有,第一张图就没有出现啊
6楼2015-07-11 22:33:11
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日记布

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by archbishop at 2015-07-11 09:49:30
用什么方法前处理的

承重后甲醇溶解啊
7楼2015-07-11 22:33:50
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日记布

金虫 (正式写手)

求大神分析一下给个解决方法

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2015-07-12 22:27:05
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日记布

金虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by xuchao7447 at 2015-07-13 08:00:07
标准品保留时间太短了,建议延长保留时间!!!

什么意思啊,再多跑一会么?可是最大风都出了啊!
10楼2015-07-13 09:22:40
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