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Kyulin

铜虫 (初入文坛)

[求助] 关于PBI121表达载体转入真核微藻中阳性克隆子的筛选问题求助 已有1人参与

用Sac I和Xba I双酶切PBI121,用目的基因替换掉载体中的GUS构建表达载体,然后用基因枪法转化微藻以求目的基因在微藻内瞬时表达,用G418筛选阳性克隆子,有文章报道说只需用15ug/ml的G418即可筛选出阳性克隆子,但是我在20ug/ml的G418平板上长出的藻提基因组后用PBI121上插入区域两端的引物竟然P不出任何东西,这是怎么回事啊?求高手指点!!!
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一切,仅为了那个梦!
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Kyulin

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-07-08 18:04:35
貌似35S在藻里面不起作用哦

35S起不起作用不是重点,重点是检测不到PBI121是否已经转进藻里了哦
一切,仅为了那个梦!
3楼2015-07-08 18:19:21
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
貌似35S在藻里面不起作用哦

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-07-08 18:04:35
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guanhr515

新虫 (初入文坛)

亲,我现在也想构建重组载体,可是我的pbi121质粒有问题,亲,可以接我一点点质粒或者菌液,如若提供。不胜感激,货到付款

发自小木虫Android客户端
4楼2016-04-06 11:19:30
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