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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 目的片段的连接
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郑凤席

新虫 (小有名气)

[求助] 目的片段的连接 已有6人参与

我将目的片段与19-T连接转化，进行蓝白斑筛选，可是结果平板上要么什么都不长，要么就是全部长白斑没有蓝斑并且菌落稀少又大个。这到底是什么原因呢？请各位大神指点迷津！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2015-07-07 23:50:19
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郑凤席

新虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 易水秋寒 at 2015-07-10 09:14:03
感觉是连接效率低，目的片段没有和载体连接上，长的白菌可能是假阳性的，建议你优化下连接体系（片段的纯度有要求），连接的时间长点，还有就是转化的时候做阴性对照，检测感受态细胞。。。

嗯嗯 好的  谢谢！🌹🌹

[ 发自小木虫客户端 ]
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15楼2015-07-10 12:04:44
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jiqinger

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
郑凤席: 金币+2, ★有帮助, 这些我都做过，验证过，没有得到我想要的答案，不过还是感谢ta 2015-07-10 15:55:00
估计是平板倒的不好，AMP没有起作用或者感受态细胞不好。
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2楼2015-07-08 13:27:49
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nonglong1

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
郑凤席: 金币+2, ★有帮助, 我觉得这都不是关键，因为这些东西我肯定不会忘记 2015-07-10 15:56:13
长白斑就对了，插入目的基因后是白斑，空载是蓝斑。另外，记得加X-gal和IPTG，否则当然都是白斑。
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植物学
3楼2015-07-08 16:32:05
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郑凤席

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by nonglong1 at 2015-07-08 16:32:05
长白斑就对了，插入目的基因后是白斑，空载是蓝斑。另外，记得加X-gal和IPTG，否则当然都是白斑。

药品全都加了，全是白的应该是有问题的吧？我检测过白斑都是没有我要的目的前段

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2015-07-09 08:14:43
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