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最近用随机引物扩增基因组DNA,有几个问题不太明白 1.我的引物只有一条,5‘端有酶切位点BamHI,中间是锚定碱基,最后是6个随机碱基。想请问大家,我扩增出来的片段,是双链吗?那么两端都是有BamHI位点吗?为什么? 2.BamHI是为了使载体和片段连接,如果只有一端有BamHI位点,不是就连接不上了? 3.转化以后提取质粒,有大于4000BP(质粒3000bp,目的片段在1000-3000不定)的产物,我想双酶切鉴定,如何选取酶切位点呢?BamHI然后再选取载体上任意一个酶切位点吗? 谢谢大家~ |
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