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wyong186木虫 (正式写手)
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[交流]
100金币求助：聚丙烯酰胺凝胶电泳+2008年10月1日
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请问:我的实验过程中需要20%的聚丙烯酰胺，那我应该配多大浓度的准备液呢？配比应该是多少呢？一般都采用什么染料呢？谢谢！ [ Last edited by wyong186 on 2008-7-29 at 15:34 ] |
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xyklmu
至尊木虫 (知名作家)
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3楼2008-07-30 07:30:27
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一般都配成40%的准备液，然后加1XTBE和水进行调配，染色方法很多，有一种我做的觉得效果比较好的染色方法，步骤如下： 1) 洗胶 取出电泳后的聚丙烯酰胺电泳胶，用200mlSterile ddH2O清洗1分钟； 2）固定 用固定液固定6分钟，固定液配制比例为：10%酒精+0.5%冰乙酸（共200ml)染色； 3）染色 用200ml2%AgNO3染色固定后的，12分钟； 4）漂洗 用200mldH2O漂洗染色后的聚丙烯酰胺电泳胶，1分钟； 5）在200ml蒸馏水中加入100μlNa2S2O3除去非还原银，1分钟； 6）显色 在200ml15%NaOH溶液中加入2ml甲醛显色,直到满意为止（4-10分钟）； 7）漂洗 用dH2O清洗甲醛-NaOH显色后的聚丙烯酰胺电泳胶，2分钟。 |
2楼2008-07-29 16:53:19
mjl3680
木虫 (小有名气)
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