应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 100金币求助：聚丙烯酰胺凝胶电泳+2008年10月1日
91/1返回列表
查看: 990  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

wyong186

木虫 (正式写手)

[交流] 100金币求助：聚丙烯酰胺凝胶电泳+2008年10月1日

请问:我的实验过程中需要20%的聚丙烯酰胺，那我应该配多大浓度的准备液呢？配比应该是多少呢？一般都采用什么染料呢？谢谢！

[ Last edited by wyong186 on 2008-7-29 at 15:34 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-07-29 15:25:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

明西2004

新虫 (初入文坛)
一般都配成40%的准备液，然后加1XTBE和水进行调配，染色方法很多，有一种我做的觉得效果比较好的染色方法，步骤如下：
1)        洗胶  取出电泳后的聚丙烯酰胺电泳胶，用200mlSterile ddH2O清洗1分钟；
2）固定  用固定液固定6分钟，固定液配制比例为：10%酒精+0.5%冰乙酸（共200ml)染色；
3）染色  用200ml2%AgNO3染色固定后的，12分钟；
4）漂洗  用200mldH2O漂洗染色后的聚丙烯酰胺电泳胶，1分钟；
5）在200ml蒸馏水中加入100μlNa2S2O3除去非还原银，1分钟；
6）显色  在200ml15%NaOH溶液中加入2ml甲醛显色,直到满意为止（4-10分钟）；
7）漂洗  用dH2O清洗甲醛-NaOH显色后的聚丙烯酰胺电泳胶，2分钟。
赞一下 回复此楼
很高兴认识大家
2楼2008-07-29 16:53:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xyklmu

至尊木虫 (知名作家)

虫眼看世界
楼主真是大方呀，呵呵，挥金如土，呵呵
跑多小分子量的蛋白用这么高浓度的PAGE胶？？
现在invitrogene公司有一种梯度的成品胶，用起来感觉很好的，适合打蛋白和小蛋白混合跑的情况。
赞一下 回复此楼
位卑未敢忘忧国。
3楼2008-07-30 07:30:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mjl3680

木虫 (小有名气)
配胶不但要看Ｔ的百分比，还要看Ｃ，
一般Ｔ要达到２０％，Ｃ一般用３％，这是用来分离多肽吧，但分子量太小，小于４０００，也挺难的，我最近跑，ＳＩＧＡＭＡ的超低分子量ＭＡＲＫＥＲ，最后两条总出不来，也用了一些办法，但不是很理想．
你配４９．５％的原溶液，丙胺２８克，甲叉１．５克，定容１００ＭＬ
分离胶，间隙胶和浓缩胶根据你加的物质不同，量也不同，随便找个文章都有详细的配比．我有些配方，可以ＥＭＡＩＬ我．
赞一下 回复此楼
4楼2008-10-01 12:12:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lykk

考马斯亮蓝染～～好象可以
赞一下 回复此楼
5楼2008-10-21 10:31:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amberking

0.5

一般都是40%的，操作和配方都参照分子克隆吧
有银子可以买现成的胶
赞一下 回复此楼
6楼2008-10-23 14:45:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvy82

铁虫 (初入文坛)
也可以参照 北京鼎国生物科技的 银染试剂盒里的银染方法来进行染色

里面的药品都是常规药品 很好用

另外，2楼的染色方法也不错 其用量在用的时候可以略为的多加一些  染出的效果可能会更好些
赞一下 回复此楼
中科院动物所在读博士
7楼2008-11-26 11:52:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guxinhan123

银虫 (正式写手)
考马斯亮蓝R250
考马斯亮蓝G250
上样量小用银染，具体方法可以参考文献
赞一下 回复此楼
8楼2008-12-02 10:12:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hnanxxl

金虫 (正式写手)
不明确要做什么试验，是跑酶（蛋白）还是跑DNA？目的不同，染色方法当然不同了。配方可以参考何忠效，张树政所编写的《电泳》。
赞一下 回复此楼
9楼2008-12-03 11:26:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wyong186 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +13 kkkl_v 2026-08-19 13/650 2026-08-19 22:37 by 宝贝虫子
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +12 基诺咪客 2026-08-17 16/800 2026-08-19 22:04 by kk 的小木虫
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖？ +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +10 yuleib84 2026-08-18 11/550 2026-08-19 07:30 by 羽毛枫f
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭