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| 50mM pH7.5的PBS怎么配制？ |
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krystal1110: 金币+5, ★有帮助 2015-07-02 20:14:03
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先配: 1M Na2HPO4：称取358g Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml 水 1M NaH2PO4：称取156g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水 （一般不需要1000ml，将质量和体积按比例缩小即可） 然后： 34.2ml的1M Na2HPO4与15.8ml的1M NaH2PO4混合，蒸馏水稀释至1000ml,即得0.05M的磷酸钠缓冲液(PH7.2)。 磷酸盐缓冲液是由单价磷酸二氢盐和双价磷酸一氢盐的混合物组成的。通过变化每种盐的量，就可配制出pH 5.8至pH8.0之间缓冲液。磷酸盐有很高的缓冲能力，在水中高度可溶。但是，它们也有不少潜在的缺点：(参考) 1.磷酸盐缓冲液抑制许多酶促反应和步骤，而这些酶促反应和步骤恰恰是分子克隆的基础，其中包括许多限制酶对DNA的切割，DNA的连接和细菌转化等。 2因为磷酸盐在乙醇中沉淀，不能用于沉淀DNA和RNA。 3磷酸盐螯合像Ca2+和Mg2+这样的阳离子。 配置量、浓度和PH值不同，但计算方法都一样：质量/（分子量*体积） 补充一下: PB与PBS是不同的. PB是phosphate buffer, 而PBS是phosphate buffered saline, 从名字上就可知了吧? 后者是缓冲生理盐水. 即, 在PB中加入0.8-0.9%的NaCl (有时我们按摩尔浓度取0.15mol/L), 其中的PB配制见上 |
2楼2015-06-19 15:22:51
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