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新虫 (初入文坛)

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专业: 昆虫学

[求助] 分子新手，PCR产物回收浓度太低，请教各位虫友！已有6人参与

本人刚开始接触分子方面的试验，准备做RNA干扰，目前正用带T7的引物跑PCR，产物带挺亮，然后用天根的试剂盒切胶回收的浓度太低，一般都在30ng/μl左右。我后续要用这个回收产物做模板走promega T7BiboMAX Express RNAi System 这个试剂盒的程序，要求模板量在1 μg，但我的回收产物远不够这个量，请教各位虫友怎么提高回收产物的量，或者有做过这个的我想请教下整个过程，非常感谢！

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1楼 2015-06-17 22:30:30

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飞飞飘过

新虫 (初入文坛)

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专业: 植物进化生物学

引用回帖:

8楼: Originally posted by 王平阳 at 2015-06-19 20:37:43
我之前做过RNAi实验，刚开始也和你一样，DNA模板浓度低上不去，没法合成RNA，后来试了很多种方法，给你介绍一下：
1、如上面虫友所说，多做几个PCR重复，我50uL反应体系做了5个重复，最后会收到一起，20uL水依次洗 ...

你好，我想麻烦问一下用第二种方法得到的产物的OD值怎么样？