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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » 地高辛探针标记效率检测
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yuqing_zm

新虫 (初入文坛)

[求助] 地高辛探针标记效率检测

准备做southern 杂交，对标记的探针进行效率检测的时候出问题了。
探针标记用的是罗氏的 DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit II ，反应过夜后根据预估产量稀释 ，试剂盒里的对照DNA也稀释了。
开始觉得对照DNA没有标记过，然后就用DIG标记了。第一次做的时候对照系列稀释（1纳克-0.1皮克）有斑点显色，自己标记的探针只有第一个（1纳克）显色。
后来师姐说那个对照DNA是标记过的，我又重新稀释对照DNA做了一次，但是对照一个显色的都没有！自己标记的探针1皮克和0.1皮克不显色，0.5皮克显色，而且和前面1纳克的亮度无差别。
是什么原因呢？？？急求解
另外还有就是那个对照DNA到底是不是标记过的呢？！
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1楼 2015-06-17 18:35:37
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sky恋

新虫 (初入文坛)
你的问题解决了嘛  怎么解决的  我遇到的问题和你类似  求助啊
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2楼2016-03-04 11:29:42
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liyamei123

银虫 (小有名气)
对照DNA是标记过的，你可以看说明书。问一个问题，说明书上有个 note: use sufficient buffer volumes to cover the membrane completely during all steps. 这里的buffer 是什么buffer
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言之无文行而不远
3楼2018-03-25 21:29:20
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七七717

新虫 (初入文坛)
一模一样的问题，跪求你怎么解决的，我已经试了两次，还这样

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4楼2018-09-19 00:15:09
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