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1楼2015-06-16 11:24:45

zp199

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【答案】应助回帖

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禾泽2010: 金币+2 2015-06-16 15:39:26

lz首先要确定用的是什么细胞系，该细胞系是否高度表达叶酸受体，还有就是，孵育时间2-6小时的话，培养基中是否加入了胎牛血清，建议不加。然后再试试看

2楼2015-06-16 15:08:17

禾泽2010

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2楼: Originally posted by zp199 at 2015-06-16 15:08:17
lz首先要确定用的是什么细胞系，该细胞系是否高度表达叶酸受体，还有就是，孵育时间2-6小时的话，培养基中是否加入了胎牛血清，建议不加。然后再试试看

用的是hela细胞，表面有过表达的叶酸受体。实验中有做对照培养基中加FBS和不加FBS。可是还是木有荧光。不知道到底是哪一步有问题还是什么细节没有注意到

3楼2015-06-16 15:41:32

zp199

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3楼: Originally posted by 禾泽2010 at 2015-06-16 15:41:32
用的是hela细胞，表面有过表达的叶酸受体。实验中有做对照培养基中加FBS和不加FBS。可是还是木有荧光。不知道到底是哪一步有问题还是什么细节没有注意到...

这么看你的操作是没有问题的，那你得考察一下加入BSA-Au cluster的量了，是不是加入量太少，在倒置荧光显微镜下看不到，建议用confocal看看，还有，激发光和发射接收范围要设置对

4楼2015-06-16 17:41:40

禾泽2010

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4楼: Originally posted by zp199 at 2015-06-16 17:41:40
这么看你的操作是没有问题的，那你得考察一下加入BSA-Au cluster的量了，是不是加入量太少，在倒置荧光显微镜下看不到，建议用confocal看看，还有，激发光和发射接收范围要设置对...

我们的浓度比文献中的都高，我们实验室之后荧光倒置，呜呜。曝光时间测了400ms-1.5s，可是都木有荧光。一直做不出来，也没有办法向老板证明不是操作问题

5楼2015-06-16 17:54:12