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新虫 (初入文坛)

[求助] PCR产物怎么削平A尾，麻烦说详细点。。。已有4人参与

用普通Taq酶进行的PCR，不想要3·端的A尾，怎么削平，麻烦说详细点，谢谢了！！！

1楼2015-06-12 17:52:13

新虫 (初入文坛)

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2楼: Originally posted by stone2239 at 2015-06-12 18:04:39
用不加A尾的酶扩增不就行了，为什么要搞这么麻烦。

不加尾的P不出来目的片段

3楼2015-06-12 18:09:31

新虫 (初入文坛)

引用回帖:

6楼: Originally posted by zeroon at 2015-06-14 13:11:34
用高保真的酶啊，比如pfu 比如primerstar max

您能说详细点么。。。。

7楼2015-06-16 10:05:32

新虫 (初入文坛)

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5楼: Originally posted by kangaroo0513 at 2015-06-12 23:54:15
PCR完成后，向管子里继续加过量的高保真酶（1ul->20ul体系），然后68度孵育30min即可。

过量的高保真酶加多少呢，如果是20ul的体系，加10ul的高保真酶，可以吗？谢谢。。

8楼2015-06-16 10:06:38

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