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niyinluo

铁虫 (小有名气)

[求助] 关于酶标板测OD值与分光光度计的比较 已有2人参与

最近在用酶标板测菌液的OD600,发现一些问题:
1.活化过夜的菌液,在酶标板中加200μL时,测的数据永远在0.5到0.6之间。。。。但一般不都是说对数期的OD600是在1.0及其以上的蛮?
2.增加了酶标板的菌液添加量之后也就是300μL时,测的数据就变成0.8左右了。。。。这是什么鬼。。。到底该相信哪个数据?
3.为了增加确信度,用分光光度计又测了一次,艾玛,这次就变成1.18了。。。。三个数字,我到底该相信谁?有没有什么统一的方法?
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liuwukang

新虫 (小有名气)

酶标仪里测od是和菌液体积有直接关系的,体积多了光程就会长od自然也就高了,而分光光度计的比色皿是固定的光程,所以本身就有一些差别,如果你是在做生长曲线,只要用同一个仪器同一个方法测量,结果都是可信的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2015-06-13 22:13:39
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xsjd666

新虫 (小有名气)

分管光度计设置对照了吗
2楼2015-06-12 09:21:16
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niyinluo

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xsjd666 at 2015-06-12 09:21:16
分管光度计设置对照了吗

嗯,分光光度计是用培养基调零的~然后还测了下去离子水的值,去离子水是-0.007

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-06-12 12:47:43
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xsjd666

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by niyinluo at 2015-06-12 12:47:43
嗯,分光光度计是用培养基调零的~然后还测了下去离子水的值,去离子水是-0.007
...

那就不太清楚了,一般测个菌液浓度用的风光光度计,他们做ELISA实验用酶标仪。OD要求很严格吗,这个只是代表菌液的大概浓度吧。
4楼2015-06-12 16:02:54
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