应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 怎样用比浊法对灰霉菌孢子进行计数？？？
161/2返回列表12下一页
查看: 2112  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

玉砌的强

金虫 (正式写手)

[求助] 怎样用比浊法对灰霉菌孢子进行计数？？？ 已有2人参与

看有文献上说是在560nm下进行比色计数，但也有说在600nm或420nm下进行计数的，另外请高手指点怎样制作用比浊法对灰霉菌孢子计数的标准曲线。谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
从心开始，从新开始......
1楼 2014-08-28 08:30:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

帖航

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
玉砌的强: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-08-28 19:08:38
先选定一个菌的最大吸光值，一般就是560，你可以参考其他OD值，然后将你的菌液做连续等梯度稀释，然后每一个稀释度下的菌液测吸光值并且用血球计数版计数，这样可以得到一条菌数-OD曲线，以后可以直接测菌液的OD值，然后带到你做的曲线里得出菌数
赞一下 回复此楼
2楼2014-08-28 14:31:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小符啦啦

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
酵母菌是560，选择600大多是细菌，有文献报道真菌的可以参照酵母和霉菌，不过我建议还是要全波长扫描一下确定波长，然后再用OD值测

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
3楼2014-08-28 18:57:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

玉砌的强

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小符啦啦 at 2014-08-28 18:57:43
酵母菌是560，选择600大多是细菌，有文献报道真菌的可以参照酵母和霉菌，不过我建议还是要全波长扫描一下确定波长，然后再用OD值测

怎样进行全波长扫描啊，我是研一小硕，刚来实验室没几天，不懂这个，请高手赐教。
赞一下 回复此楼
从心开始，从新开始......
4楼2014-08-28 19:10:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

玉砌的强

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 帖航 at 2014-08-28 14:31:24
先选定一个菌的最大吸光值，一般就是560，你可以参考其他OD值，然后将你的菌液做连续等梯度稀释，然后每一个稀释度下的菌液测吸光值并且用血球计数版计数，这样可以得到一条菌数-OD曲线，以后可以直接测菌液的OD值， ...

我看有篇文章《真菌孢子三种计数方法相关性的探讨》里的方法是对黑曲霉、白地霉、康宁木霉的孢子用比浊法计数是在560nm下进行的，我前天也试着做了一次，结果不是很好。
赞一下 回复此楼
从心开始，从新开始......
5楼2014-08-28 19:14:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小符啦啦

银虫 (初入文坛)
用紫外分光光度计测量，不过测的时候要迅速吧，因为我觉得孢子容易沉下去

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
6楼2014-08-28 19:44:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

玉砌的强

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小符啦啦 at 2014-08-28 19:44:29
用紫外分光光度计测量，不过测的时候要迅速吧，因为我觉得孢子容易沉下去

我前天用实验室的酶标仪测的，吸光度很低，估计是孢子沉下去了吧，下次再做的时候加过阳我再用移枪吹吹。
赞一下 回复此楼
从心开始，从新开始......
7楼2014-08-28 20:10:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

帖航

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 玉砌的强 at 2014-08-28 19:14:45
我看有篇文章《真菌孢子三种计数方法相关性的探讨》里的方法是对黑曲霉、白地霉、康宁木霉的孢子用比浊法计数是在560nm下进行的，我前天也试着做了一次，结果不是很好。...

全波长扫描要看仪器，如果仪器有全波长扫描就可以，如果没有，要用最原始的方法，非常耗时。比如你扫可见光区段，就是扫280nm下的OD，然后扫281nm下OD，再扫282nm......一直扫到800nm，然后波长对OD作图，找出最大吸光值。还有你用酶标仪侧，用的是比色皿还是96/48孔板，比色皿的厚度是1cm，48孔板加1ml样，厚度差不多是1cm。而且用比色皿和酶标板的光路是不一样的
赞一下 回复此楼
8楼2014-08-29 09:39:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

玉砌的强

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 帖航 at 2014-08-29 09:39:08
全波长扫描要看仪器，如果仪器有全波长扫描就可以，如果没有，要用最原始的方法，非常耗时。比如你扫可见光区段，就是扫280nm下的OD，然后扫281nm下OD，再扫282nm......一直扫到800nm，然后波长对OD作图，找出最大 ...

我用的是96孔板，加样200ul，在560nm 下测孢子浓度为1X10的8次方的孢子悬液的OD值为0.1346，感觉很低。如果做全波长扫描，是不是最大吸收峰对应的波长即为灰霉菌孢子悬液的最适波长啊？
赞一下 回复此楼
从心开始，从新开始......
9楼2014-08-29 11:02:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

帖航

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 玉砌的强 at 2014-08-29 11:02:09
我用的是96孔板，加样200ul，在560nm 下测孢子浓度为1X10的8次方的孢子悬液的OD值为0.1346，感觉很低。如果做全波长扫描，是不是最大吸收峰对应的波长即为灰霉菌孢子悬液的最适波长啊？...

对，OD值低就加大菌液的浓度，96孔板很方便测得，你直接测10^0,10^1,10^2.。。。。。一直到10^8不就行了，做三组平行，酶标仪测一下2分钟曲线就出来了，OD值不要大于2
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

玉砌的强
10楼2014-08-29 15:19:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 玉砌的强 的主题更新
161/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭