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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于酶标板测OD值与分光光度计的比较
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niyinluo

铁虫 (小有名气)

[求助] 关于酶标板测OD值与分光光度计的比较 已有2人参与

最近在用酶标板测菌液的OD600，发现一些问题：
1.活化过夜的菌液，在酶标板中加200μL时，测的数据永远在0.5到0.6之间。。。。但一般不都是说对数期的OD600是在1.0及其以上的蛮？
2.增加了酶标板的菌液添加量之后也就是300μL时，测的数据就变成0.8左右了。。。。这是什么鬼。。。到底该相信哪个数据？
3.为了增加确信度，用分光光度计又测了一次，艾玛，这次就变成1.18了。。。。三个数字，我到底该相信谁？有没有什么统一的方法？
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1楼 2015-06-11 18:14:31
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wadecao

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
niyinluo: 金币+5, ★★★很有帮助, 如果，酶标仪测的OD600最大在0.6左右，这样的数值英文文章能用蛮？ 2015-06-16 15:37:53
本帖内容被屏蔽
9楼2015-06-15 20:59:22
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liuwukang

新虫 (小有名气)
酶标仪里测od是和菌液体积有直接关系的，体积多了光程就会长od自然也就高了，而分光光度计的比色皿是固定的光程，所以本身就有一些差别，如果你是在做生长曲线，只要用同一个仪器同一个方法测量，结果都是可信的

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6楼2015-06-13 22:13:39
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ccdbaobao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

用分光光度计测OD值是会有一些误差，但如果要求不是特别严格的话也是可以的，比如确定生长曲线，还是比较可信的。
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8楼2015-06-15 15:26:38
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普通回帖

xsjd666

新虫 (小有名气)
分管光度计设置对照了吗
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2楼2015-06-12 09:21:16
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niyinluo

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xsjd666 at 2015-06-12 09:21:16
分管光度计设置对照了吗

嗯，分光光度计是用培养基调零的～然后还测了下去离子水的值，去离子水是-0.007

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3楼2015-06-12 12:47:43
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xsjd666

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by niyinluo at 2015-06-12 12:47:43
嗯，分光光度计是用培养基调零的～然后还测了下去离子水的值，去离子水是-0.007
...

那就不太清楚了，一般测个菌液浓度用的风光光度计，他们做ELISA实验用酶标仪。OD要求很严格吗，这个只是代表菌液的大概浓度吧。
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4楼2015-06-12 16:02:54
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niyinluo

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xsjd666 at 2015-06-12 16:02:54
那就不太清楚了，一般测个菌液浓度用的风光光度计，他们做ELISA实验用酶标仪。OD要求很严格吗，这个只是代表菌液的大概浓度吧。...

用分光光度计那个比色皿用的一次性的还是需要灭菌什么之类的？我们实验室的分光光度计是用做理化用的~~~不太能给我用来测病原菌
OD值，应该是代表菌液的大概浓度的~~~但是现在不太清楚这两者之间的对照关系~~~只有一个经验值放在这边~~~想要偷懒用一用这个数值····结果不太可靠。即使我自己做标曲，那也得需要仪器正确的数值呢~~~不太知道这三个数据哪个更好使。。。。
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5楼2015-06-13 19:48:10
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niyinluo

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by liuwukang at 2015-06-13 22:13:39
酶标仪里测od是和菌液体积有直接关系的，体积多了光程就会长od自然也就高了，而分光光度计的比色皿是固定的光程，所以本身就有一些差别，如果你是在做生长曲线，只要用同一个仪器同一个方法测量，结果都是可信的
...

哈哈哈，我发现了什么～

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7楼2015-06-14 12:20:22
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niyinluo

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by ccdbaobao at 2015-06-15 15:26:38
用分光光度计测OD值是会有一些误差，但如果要求不是特别严格的话也是可以的，比如确定生长曲线，还是比较可信的。

就是用于测定生长曲线的，老师觉得测的数值偏低，生长曲线画出来不好看，可能外文期刊不能发表，这样子～所以，现在也不知道要怎么办了〒_〒

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10楼2015-06-16 15:40:45
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