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niyinluo

铁虫 (小有名气)

[求助] 关于酶标板测OD值与分光光度计的比较 已有2人参与

最近在用酶标板测菌液的OD600,发现一些问题:
1.活化过夜的菌液,在酶标板中加200μL时,测的数据永远在0.5到0.6之间。。。。但一般不都是说对数期的OD600是在1.0及其以上的蛮?
2.增加了酶标板的菌液添加量之后也就是300μL时,测的数据就变成0.8左右了。。。。这是什么鬼。。。到底该相信哪个数据?
3.为了增加确信度,用分光光度计又测了一次,艾玛,这次就变成1.18了。。。。三个数字,我到底该相信谁?有没有什么统一的方法?
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wadecao

禁虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
niyinluo: 金币+5, ★★★很有帮助, 如果,酶标仪测的OD600最大在0.6左右,这样的数值英文文章能用蛮? 2015-06-16 15:37:53
本帖内容被屏蔽

9楼2015-06-15 20:59:22
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liuwukang

新虫 (小有名气)

酶标仪里测od是和菌液体积有直接关系的,体积多了光程就会长od自然也就高了,而分光光度计的比色皿是固定的光程,所以本身就有一些差别,如果你是在做生长曲线,只要用同一个仪器同一个方法测量,结果都是可信的

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6楼2015-06-13 22:13:39
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ccdbaobao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

用分光光度计测OD值是会有一些误差,但如果要求不是特别严格的话也是可以的,比如确定生长曲线,还是比较可信的。
8楼2015-06-15 15:26:38
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xsjd666

新虫 (小有名气)

分管光度计设置对照了吗
2楼2015-06-12 09:21:16
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niyinluo

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xsjd666 at 2015-06-12 09:21:16
分管光度计设置对照了吗

嗯,分光光度计是用培养基调零的~然后还测了下去离子水的值,去离子水是-0.007

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-06-12 12:47:43
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xsjd666

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by niyinluo at 2015-06-12 12:47:43
嗯,分光光度计是用培养基调零的~然后还测了下去离子水的值,去离子水是-0.007
...

那就不太清楚了,一般测个菌液浓度用的风光光度计,他们做ELISA实验用酶标仪。OD要求很严格吗,这个只是代表菌液的大概浓度吧。
4楼2015-06-12 16:02:54
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niyinluo

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xsjd666 at 2015-06-12 16:02:54
那就不太清楚了,一般测个菌液浓度用的风光光度计,他们做ELISA实验用酶标仪。OD要求很严格吗,这个只是代表菌液的大概浓度吧。...

用分光光度计那个比色皿用的一次性的还是需要灭菌什么之类的?我们实验室的分光光度计是用做理化用的~~~不太能给我用来测病原菌
OD值,应该是代表菌液的大概浓度的~~~但是现在不太清楚这两者之间的对照关系~~~只有一个经验值放在这边~~~想要偷懒用一用这个数值····结果不太可靠。即使我自己做标曲,那也得需要仪器正确的数值呢~~~不太知道这三个数据哪个更好使。。。。
5楼2015-06-13 19:48:10
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niyinluo

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by liuwukang at 2015-06-13 22:13:39
酶标仪里测od是和菌液体积有直接关系的,体积多了光程就会长od自然也就高了,而分光光度计的比色皿是固定的光程,所以本身就有一些差别,如果你是在做生长曲线,只要用同一个仪器同一个方法测量,结果都是可信的
...

哈哈哈,我发现了什么~

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7楼2015-06-14 12:20:22
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niyinluo

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by ccdbaobao at 2015-06-15 15:26:38
用分光光度计测OD值是会有一些误差,但如果要求不是特别严格的话也是可以的,比如确定生长曲线,还是比较可信的。

就是用于测定生长曲线的,老师觉得测的数值偏低,生长曲线画出来不好看,可能外文期刊不能发表,这样子~所以,现在也不知道要怎么办了〒_〒

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
10楼2015-06-16 15:40:45
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