应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 甘油管保种，质粒丢失原因？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
171/2返回列表12下一页
查看: 1976  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

liumikewolf

金虫 (小有名气)

[交流] 甘油管保种，质粒丢失原因？

甘油管保藏大肠杆菌，内含amp 和km 抗性质粒，保存4个月后，接种液体抗性培养基，没有生长！难道质粒丢失了吗？急寻答案!!!!!!!!
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-07-25 09:47:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaoyaochong

银虫 (正式写手)
★
lixiaoyi1981(金币+1,VIP+0):呵呵，谢谢
不应该吧，你转到板子上看看，看能不能生长，让它复苏一下，再液体培养，如果这样还不行，是不是你保存的不好，细胞冻死了
赞一下(10人) 回复此楼
2楼2008-07-25 10:46:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

春雨秋实

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
reasonspare(金币+4,VIP+0):thx
你冻存是用的80%的甘油吗？在冻存管中菌液取0.8ml，80%甘油0.2ml
一般冻存的菌株采用“慢冻速溶”的方法，就是在冻存时，准备冻存菌液要先在4C°冰箱中4h，再放入-20C°冰箱中过夜，次日放入-80C°超低温冰箱中保藏。如果直接放入
-80C°超低温冰箱中容易将菌种冻死。
解冻时应该快速，直接从-80C°超低温冰箱中取出，在30C°水浴锅中放置1~2min，解冻后在平皿上涂平板，菌株复活后，在平皿上划线，纯化菌株后，挑单菌落至试管斜面。
我想你的菌株冻死的可能性较大
赞一下(10人) 回复此楼
3楼2008-07-25 11:10:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Frank2007198

铜虫 (小有名气)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
我们实验室在冻存细菌时都是在—80度冰箱里直来直去的，没有采用楼上所说的方法，也没出过什么问题。
质粒在细菌传代过多的情况下容易丢失，甘油保存应该没什么问题吧
赞一下(10人) 回复此楼
4楼2008-07-25 17:14:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

figo.339

木虫 (著名写手)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
加入甘油后混匀了吗？我加都是加60%的甘油，与菌液对半加入
赞一下(10人) 回复此楼
5楼2008-07-25 21:43:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liumikewolf

金虫 (小有名气)
这4个月中间有几次停电，反复的冻融影响有多大？
赞一下 回复此楼
6楼2008-07-26 14:45:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shensc727

金虫 (小有名气)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
反复冻融影响不大！我经常反复冻融接菌，从来没有出现问题！
最大的可能就是你的甘油管做的有问题，菌都已经冻死了！在抗性平板上筛选一下吧！
赞一下(10人) 回复此楼
7楼2008-07-28 14:21:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

argnout

金虫 (小有名气)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):积极交流奖
我都是摇一摇直接放进去-70度,划菌时不用融,直接用接种环刮一下划线
赞一下(10人) 回复此楼
8楼2008-08-01 11:32:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

phytoman

银虫 (小有名气)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):thx
在一个稀释梯度，减少甘油对大肠杆菌的影响
赞一下(10人) 回复此楼
9楼2008-08-05 10:45:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hanjun80

金虫 (正式写手)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
引用回帖:
Originally posted by liumikewolf at 2008-7-26 14:45:
这4个月中间有几次停电，反复的冻融影响有多大？

反复冻融是有影响的：

有人做过实验，反复冻融六次，相当于用超声波破碎几分钟……
具体的数值我忘记了……
赞一下(10人) 回复此楼
我笃信:人定胜天！
10楼2008-08-05 12:03:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liumikewolf 的主题更新
171/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 274求调剂 +17 顾九笙要谦虚 2026-03-24 23/1150 2026-03-27 15:16 by caszguilin
[考研] 085600材料与化工调剂 +10 A-哆啦Z梦 2026-03-23 16/800 2026-03-27 15:13 by caszguilin
[考研] 291求调剂 +11 hhhhxn.. 2026-03-23 16/800 2026-03-27 14:14 by hhhhxn..
[考研] 085600，材料与化工321分调剂 +4 大馋小子 2026-03-27 6/300 2026-03-27 14:11 by 松花缸1201
[考研] 329求调剂 +4 星野? 2026-03-26 4/200 2026-03-27 12:00 by 不吃魚的貓
[考研] 材料与化工考研调剂 +16 孅華 2026-03-22 16/800 2026-03-27 11:23 by 王笑宇一定是研�
[考研] 349求调剂 +4 李木子啊哈哈 2026-03-25 4/200 2026-03-26 22:49 by fmesaito
[考研] 294分080500材料科学与工程求调剂 +4 柳溪边 2026-03-26 4/200 2026-03-26 21:14 by XPU李庆
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:57 by nihaoar
[考研] 286求调剂 +13 Faune 2026-03-21 13/650 2026-03-26 19:52 by peike
[考研] 281求调剂 +3 亚克西good 2026-03-26 5/250 2026-03-26 19:48 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工（085600）296求调剂 +9 稻妻小编 2026-03-26 9/450 2026-03-26 16:16 by 不吃魚的貓
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭