应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 甘油管保种，质粒丢失原因？
172/2返回列表上一页12
查看: 2338  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

hiablen

金虫 (小有名气)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
引用回帖:
Originally posted by 春雨秋实 at 2008-7-25 11:10:
你冻存是用的80%的甘油吗？在冻存管中菌液取0.8ml，80%甘油0.2ml
一般冻存的菌株采用“慢冻速溶”的方法，就是在冻存时，准备冻存菌液要先在4C°冰箱中4h，再放入-20C°冰箱中过夜，次日放入-80C°超低温冰箱中保 ...

不是吧，应该是快冻慢融吧。我都是这么做的，但是没有什么问题啊
如果甘油的浓度控制不好，可能会导致质粒的丢失的。一个工程师如是说，所以把甘油控制在8%-10%之间应该没有什么问题的。
赞一下(10人) 回复此楼
每天一登录，开心领金币！
11楼2008-08-05 18:24:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chysx6

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):欢迎常来，积极交流
"接种液体抗性培养基，没有生长！难道质粒丢失了吗？"

看了楼主描述和楼上几位虫子的回答，强烈认同2，3楼意见

如果当初保存菌种确实没问题，质粒是不会丢的，不能说没长就是丢失

长期保存的菌种需要在平板上活化一下，（减少抗生素对菌体伤害），然后再去接种

到液体培养基

个人认为与甘油无重大关系
赞一下(10人) 回复此楼
12楼2008-08-08 01:30:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xyklmu

至尊木虫 (知名作家)

虫眼看世界
★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论 ~~
如果当时保种时甘油的浓度等没有问题的话，我觉着是复苏的问题。一般冻存的菌株要在平板上活化一下的，直接用液体培养基可能会有些问题。还有你是多少时间后发现没有长出菌来的，过夜培养？？这个时间估计比平时要长一些的。
赞一下(10人) 回复此楼
位卑未敢忘忧国。
13楼2008-08-08 06:44:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liumikewolf

金虫 (小有名气)
谢谢大家的宝贵意见,
我也认为中间的平板复苏是必要的.
赞一下 回复此楼
14楼2008-11-10 14:40:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

veronica5129

铜虫 (初入文坛)
★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论 ~~
一般保存在15%-30%（最终混合浓度）的甘油里都没问题。
赞一下(10人) 回复此楼
性格决定命运
15楼2008-11-10 15:04:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaoxiag

银虫 (小有名气)
是不是抗生素的浓度有问题？或是抗生素失效了？
赞一下 回复此楼
16楼2008-11-10 16:17:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

right7888

新虫 (初入文坛)
★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论 ~~鼓励新虫~
保存久了会有质粒丢失的现象，我们差不多保存了一年多后再用要做下PCR。不过你的才4个月，应该不是。
赞一下(10人) 回复此楼
17楼2008-11-10 22:25:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liumikewolf 的主题更新
172/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 13/650 2026-11-05 17:47 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 kvewwGtKktqB 2026-11-04 11/550 2026-11-05 17:47 by My20PsvIExYO
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 8/400 2026-11-05 17:38 by My20PsvIExYO
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-05 17:36 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-05 17:36 by My20PsvIExYO
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-05 17:36 by My20PsvIExYO
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 9/450 2026-11-05 17:26 by My20PsvIExYO
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 9/450 2026-11-05 17:25 by My20PsvIExYO
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 16/800 2026-11-05 17:25 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 19/950 2026-11-05 17:25 by My20PsvIExYO
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 13/650 2026-11-05 17:15 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 7/350 2026-11-05 16:08 by My20PsvIExYO
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-05 15:46 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 6/300 2026-11-05 15:46 by My20PsvIExYO
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-05 15:36 by My20PsvIExYO
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 10/500 2026-11-05 15:35 by My20PsvIExYO
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-05 15:24 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 9/450 2026-11-05 15:13 by My20PsvIExYO
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
[基金申请] 各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧 +5 iaeyuan 2026-11-01 5/250 2026-11-04 14:43 by jinchengzi
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭