24小时热门版块排行榜    

查看: 2196  |  回复: 16
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

liumikewolf

金虫 (小有名气)

[交流] 甘油管保种,质粒丢失原因?

甘油管保藏大肠杆菌,内含amp 和km 抗性质粒,保存4个月后,接种液体抗性培养基,没有生长!难道质粒丢失了吗?急寻答案!!!!!!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xyklmu

至尊木虫 (知名作家)

虫眼看世界

★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论 ~~
如果当时保种时甘油的浓度等没有问题的话,我觉着是复苏的问题。一般冻存的菌株要在平板上活化一下的,直接用液体培养基可能会有些问题。还有你是多少时间后发现没有长出菌来的,过夜培养??这个时间估计比平时要长一些的。
位卑未敢忘忧国。
13楼2008-08-08 06:44:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

yaoyaochong

银虫 (正式写手)


lixiaoyi1981(金币+1,VIP+0):呵呵,谢谢
不应该吧,你转到板子上看看,看能不能生长,让它复苏一下,再液体培养,如果这样还不行,是不是你保存的不好,细胞冻死了
2楼2008-07-25 10:46:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

春雨秋实

银虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
reasonspare(金币+4,VIP+0):thx
你冻存是用的80%的甘油吗?在冻存管中菌液取0.8ml,80%甘油0.2ml
一般冻存的菌株采用“慢冻速溶”的方法,就是在冻存时,准备冻存菌液要先在4C°冰箱中4h,再放入-20C°冰箱中过夜,次日放入-80C°超低温冰箱中保藏。如果直接放入
-80C°超低温冰箱中容易将菌种冻死。
解冻时应该快速,直接从-80C°超低温冰箱中取出,在30C°水浴锅中放置1~2min,解冻后在平皿上涂平板,菌株复活后,在平皿上划线,纯化菌株后,挑单菌落至试管斜面。
我想你的菌株冻死的可能性较大
3楼2008-07-25 11:10:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Frank2007198

铜虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
我们实验室在冻存细菌时都是在—80度冰箱里直来直去的,没有采用楼上所说的方法,也没出过什么问题。
质粒在细菌传代过多的情况下容易丢失,甘油保存应该没什么问题吧
4楼2008-07-25 17:14:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +55 医学老男孩 2026-08-13 123/6150 2026-08-19 23:44 by stan_et
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +13 kkkl_v 2026-08-19 13/650 2026-08-19 22:37 by 宝贝虫子
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +10 yuleib84 2026-08-18 11/550 2026-08-19 07:30 by 羽毛枫f
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
请填处理意见