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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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Lord1990_

新虫 (初入文坛)

[求助] 细胞技术求助 已有1人参与

请各位高手帮我看看,我这是外周血提取的单个核细胞,最底层的是什么东西啊?谢谢

细胞技术求助
显微镜下的细胞.jpg
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雪痕

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

图片真心不清楚
首先得确认下你是用什么培养的,三层瓶还是别的什么
第二,是否是血小板或者别的细胞,比如单核细胞等等
2楼2015-06-17 10:52:28
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Lord1990_

新虫 (初入文坛)

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2楼: Originally posted by 雪痕 at 2015-06-17 10:52:28
图片真心不清楚
首先得确认下你是用什么培养的,三层瓶还是别的什么
第二,是否是血小板或者别的细胞,比如单核细胞等等

我提取的是外周血单核细胞,体外进行培养,现在不了解现在培养瓶里的到底是不是单核细胞,请教您一下,希望得到你的帮助,谢谢,这是我最近拍的图片,
细胞技术求助-1
IMG_20150624_153116.jpg

3楼2015-06-25 09:03:43
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雪痕

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Lord1990_ at 2015-06-25 09:03:43
我提取的是外周血单核细胞,体外进行培养,现在不了解现在培养瓶里的到底是不是单核细胞,请教您一下,希望得到你的帮助,谢谢,这是我最近拍的图片,

IMG_20150624_153116.jpg
...

仅镜下来看,应该悬浮的居多,从形状和状态看,部分为单核细胞,也有部分淋巴细胞,当然还有别的细胞成分
再者,你这是外周血提取后培养多长时间的照片,第0天(提取当日算)还是第4天等等,有时添加完某些因子后,细胞会在发生贴壁后重新悬浮起来。
准确的鉴定单核细胞,可以做一下流式鉴定
4楼2015-06-25 09:53:06
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Lord1990_

新虫 (初入文坛)

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4楼: Originally posted by 雪痕 at 2015-06-25 09:53:06
仅镜下来看,应该悬浮的居多,从形状和状态看,部分为单核细胞,也有部分淋巴细胞,当然还有别的细胞成分
再者,你这是外周血提取后培养多长时间的照片,第0天(提取当日算)还是第4天等等,有时添加完某些因子后 ...

在镜下看,贴壁的较多,这是我养7天以后的图片,而我什么都没加,有老师说,我得加入M-CSF或是pma等诱导因子才能让其分化,我不了解这方面的内容,请问是这样么?还有单核细胞能贴壁么?有人认为是分化为巨噬细胞后才能贴壁和传代,还有分化后的单核细胞能传几代啊,非常感谢!!!
5楼2015-06-25 10:24:56
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Lord1990_

新虫 (初入文坛)

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4楼: Originally posted by 雪痕 at 2015-06-25 09:53:06
仅镜下来看,应该悬浮的居多,从形状和状态看,部分为单核细胞,也有部分淋巴细胞,当然还有别的细胞成分
再者,你这是外周血提取后培养多长时间的照片,第0天(提取当日算)还是第4天等等,有时添加完某些因子后 ...

我的是养7天后的细胞,而且我在晃动培养瓶的时候,贴壁的较多,有几个问题请教,希望您能帮助,一,单核细胞在体外不加诱导因子如M-CSF的情况下能自己分化为巨噬细胞么?二,单核细胞在体外能传代么,能传几代,能否贴壁。
6楼2015-06-25 10:28:41
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雪痕

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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6楼: Originally posted by Lord1990_ at 2015-06-25 10:28:41
我的是养7天后的细胞,而且我在晃动培养瓶的时候,贴壁的较多,有几个问题请教,希望您能帮助,一,单核细胞在体外不加诱导因子如M-CSF的情况下能自己分化为巨噬细胞么?二,单核细胞在体外能传代么,能传几代,能 ...

GM-CSF等因子会对单核细胞的分化有影响,到现在为止,我不明确你提取单核细胞的目的是什么,是为了诱导分化成巨噬细胞还是什么,单核细胞我还没有进行传代实验,只是做过淋巴细胞如CIK的传代,具体的传代数要根据细胞的状态和传代的频率等等来决定,至于是否贴壁,你可以做实验尝试下,每个人做的结果可能都不一样
7楼2015-06-25 10:37:38
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Lord1990_

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 雪痕 at 2015-06-25 10:37:38
GM-CSF等因子会对单核细胞的分化有影响,到现在为止,我不明确你提取单核细胞的目的是什么,是为了诱导分化成巨噬细胞还是什么,单核细胞我还没有进行传代实验,只是做过淋巴细胞如CIK的传代,具体的传代数要根据细 ...

我的实验是这样的,用MSU(单钠尿酸盐)刺激外周血的单核细胞,检测不同剂量下的MSU对细胞刺激后,细胞中某些蛋白的表达变化,首先,我要验证MSU怎样的刺激细胞的,就是探讨细胞的吞噬作用,那么细胞就应该是吞噬细胞。我所看到的文献上说用的是THP-1细胞株,而我直接是从外周血提取的,是原代细胞,有人说外周血中的细胞是终末分化细胞,不能传代和分化的,所以遇到了上述的种种问题。
8楼2015-06-25 13:50:27
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