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UCNP修饰DNA一直不成功
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最近一直尝试在PAA-UCNP上修饰NH2-DNA，可是一直没有成功。主要参考了武大Wang等人的Aptamer biosensor based on fluorescence resonance energy transfer from upconverting phosphors to carbon nanoparticles for thrombin detection in human plasma[J]. Analytical chemistry, 2011, 83(21): 8130-8137.我的主要步骤如下： 1.5mg PAA-UCNP分散在2mLMES(10mM,PH5.5) 2.加入EDC ·HCl 0.8mg（2mM),NHS1.2mg(5mM),30℃缓慢振荡30min； 3.离心（这一步水洗和未水洗都尝试过） 4.分散在2mL 含2.5μM NH2-DNA的HEPES buffer（10mM，PH7.2）； 5.30℃，反应过夜； 6.离心，HEPES洗涤3次，最后分散在2mL Tris-HCl(10mM,PH7.4) 然后作紫外表征，在260nm附近看不到峰，上层液260nm仍有很强的DNA峰（和未修饰前一样）。 有么有做过类似的，希望可以给点建议，谢谢！ |
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2楼2015-06-20 14:18:17