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惊叹号

金虫 (正式写手)

[求助] PCR污染 已有8人参与

最近PCR老是出现假阳性,请大家帮忙分析一下。
我第一次扩的时候,反复摸了好多个温度,都没有扩出来,重新提RNA后一次就扩出来了,但是问题是,从此以后,每次扩增任何模版都是阳性,甚至不加模版也能扩出目的条带,更换了水、枪头、Ep管,重新稀释引物后再扩,还是存在假阳性,Mix也是新的,所以就迷茫了。。。
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Davidzjy

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by 惊叹号 at 2015-06-08 17:17:49
换了个位置,上午把所有枪,还有能照的东西都用紫外照了,仍然无济于事...

枪的污染紫外线是无能为力的
如果你用的不是带滤芯的枪头
那么某次误操作时吸到枪体内的DNA在后面的操作时会被吹出来
15楼2015-06-11 13:49:49
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慕慕123

新虫 (小有名气)

今天上实验老师刚刚解释过,可是我们做的是DNA。。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2015-06-07 20:12:04
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惊叹号

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 慕慕123 at 2015-06-07 20:12:04
今天上实验老师刚刚解释过,可是我们做的是DNA。。

PCR扩增的都是DNA
3楼2015-06-07 20:13:45
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luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
惊叹号: 金币+5, 有帮助, 可能是我在那个实验室构建并提过阳性质粒,所以可能整个实验室都污染了。 2015-06-07 20:24:38
建议LZ换一把新的移液枪再试一次,如果还不行到其他实验室找个认识的人带加一次样。

[ 发自小木虫客户端 ]
大家相互帮助哈
4楼2015-06-07 20:15:33
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