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women0517

铜虫 (小有名气)

[交流] 不小心被紫外照射后的DNA,有什么补救方法吗??急求! 已有9人参与

之前做的大批量的DNA实验。有次不小心放置在紫外灯下一会儿,自从那次之后,再做pcr跑电泳,均无条带。有时拿几个DNA样本做实验,会有不太明显的条带,但远没有之前的亮度了。
请教一下各位大神,有没有什么办法可以挽救这种现状??如果我下次提高pcr体系中所加DNA的量,会不会跑出的条带亮度效果会好一些??
自从被紫外照射后,做的pcr结果很不稳定,有时会有几个条带,但有时基本什么都没有。我的DNA样本量很大,接近100例,所以如果再重新提取的话,要耗费极大的人力和时间。
求大神指点一二!!不胜感激!!
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luwei13566

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by lxzk at 2015-06-02 03:18:56
可以使用CPD photolyase和(6-4)PP photolyase 修复两种嘧啶二聚体。不过这两种酶没有商品化,你没有办法搞到的话也可以用NEB的PreCR Repair Mix,可以修复CPD,不能修复(6-4)PP。不过CPD比(6-4)PP要多5到10倍,能把 ...

用试剂盒修复后的模板也不能保证一定能用,还不如用买那个的钱多买几盒提基因组试剂盒重新提,关键是保险。

[ 发自小木虫客户端 ]
大家相互帮助哈
14楼2015-06-02 16:15:42
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查看全部 20 个回答

晞朔

金虫 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-02 23:12:30
紫外照射,是会发生突变的。就算你P出来的带是符合你要求的,序列也可能发生变化。建议重提吧
2楼2015-06-01 16:59:19
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xmcliulei

银虫 (小有名气)

这个真没办法,建议你重新提取吧~一百个基因组还行吧,我一天就能干50个基因组~加油哦~
3楼2015-06-01 23:56:58
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丝状真君

新虫 (初入文坛)

嘧啶二聚体啊大哥,这真没办法了
4楼2015-06-01 23:58:14
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