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制备脂质体遇到问题 已有2人参与
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请教大侠， 现在按Biacor （SPR仪器公司）的要求制作脂质体，用的是Avanti提供的lipid，滤膜和小过滤设备。 实验要求50nm滤膜，但我做的脂质体很难通过。给多大压力都不通过，压力过大膜就破掉了。 本实验步骤如下： 称取76mg POPC溶于10ml氯仿， 旋转蒸发蒸出氯仿，然后真空泵旋蒸2h。 得到的一层薄膜用缓冲溶液溶解，混悬， 放到液氮里冷冻，再解冻，反复5次。 混悬液用注射器在过滤装置上透过50nm滤膜。 此时遇到问题，因为50nm根本过不去，我就先用100nm膜过滤，但还是过不去。像堵住了一样，使劲推也不进行最后膜就破掉了。 1.以为是脂质体体积太大了，我就将混悬液稀释了3倍。 2.想让脂质体均匀，我又用超声波超声了5min 但结果无济于事。 请有经验的大侠们告诉我一下，以上步骤是不是哪儿出了问题。或者该怎么做才对，谢谢大家！ |
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