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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 电泳时为什么会有黑黑的一团，怎么破？
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饿的神啊

新虫 (著名写手)

[求助] 电泳时为什么会有黑黑的一团，怎么破？ 已有7人参与

如题

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2015-05-25 15:39:20
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

WHABnew

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-05-25 18:44:36
黑团都无所谓，减少你的loading buffer的用量，关键是你的样品都蛋白污染这才是大问题。
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3楼2015-05-25 15:55:04
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lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
饿的神啊: 金币+5, ★有帮助 2015-05-26 16:34:25
是loadingbuffer 里的溴酚蓝。
如果想结果好看一点的话，少加点溴酚蓝就好了。
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9楼2015-05-26 09:03:07
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chenenslogan

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
那个就是loading buffer，没啥影响，但是那个背景太亮了。。。曝光时间过长了。。。。至少降低一半亮度，mark的亮度都没啥区别饿了。。惨白的一片。。。。
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饿的神啊
everythinghappensforthebest
15楼2015-05-26 15:19:47
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普通回帖

饿的神啊

新虫 (著名写手)
是loading buffer太多吗？大概每孔有1.5微升的loading buffer

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2015-05-25 15:54:03
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人车

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-05-25 18:44:42
那个应该是你的Loading Buffer吧 你加多少量啊
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4楼2015-05-25 15:57:53
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饿的神啊

新虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by WHABnew at 2015-05-25 15:55:04
黑团都无所谓，减少你的loading buffer的用量，关键是你的样品都蛋白污染这才是大问题。

蛋白污染？怎们会？我只是做了PCR啊，应该是DNA啊，怎么会有蛋白呢？

[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼2015-05-25 17:37:32
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饿的神啊

新虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 人车 at 2015-05-25 15:57:53
那个应该是你的Loading Buffer吧 你加多少量啊

取5微升，和大概有1.5微升的loading buffer混匀，然后吸取5微升点样

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6楼2015-05-25 17:38:47
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WHABnew

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 饿的神啊 at 2015-05-25 17:37:32
蛋白污染？怎们会？我只是做了PCR啊，应该是DNA啊，怎么会有蛋白呢？
...

看你的胶孔里面一片亮你觉得没问题么？意思是提取的核酸中有污染呗
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7楼2015-05-25 17:49:30
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饿的神啊

新虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by WHABnew at 2015-05-25 17:49:30
看你的胶孔里面一片亮你觉得没问题么？意思是提取的核酸中有污染呗...

你的意思是点样孔吗？可是我只点了8个样加marker，别的都是空的，空的也很亮，也是蛋白污染吗？

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8楼2015-05-26 08:48:40
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WHABnew

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
饿的神啊: 金币+5, ★有帮助 2015-05-26 16:34:16
引用回帖:
8楼: Originally posted by 饿的神啊 at 2015-05-26 08:48:40
你的意思是点样孔吗？可是我只点了8个样加marker，别的都是空的，空的也很亮，也是蛋白污染吗？
...

如果只有八个孔那就不是了，可能就是电泳液或者胶的问题，要是自己配的loading buffer溴酚蓝减少点
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10楼2015-05-26 09:45:24
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