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galaxysnow

铜虫 (初入文坛)

[求助] sephadex LH-20柱层析过程中,可以暂停过夜吗? 已有1人参与

请问sephadex LH-20柱层析过程中,可以停一段时间后接着跑柱子洗脱吗?今天做不完了,如果晚上停止第二天再接着洗脱样品的话,对样品组分分离影响大吗? 初次接触,谢谢各位先。
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hydros

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
galaxysnow: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-05-19 15:52:46
引用回帖:
3楼: Originally posted by galaxysnow at 2015-05-19 11:37:14
太感谢了,那请问sephadex LH-20用甲醇溶胀,之后想进行梯度洗脱,即先用100%水洗,逐步增加甲醇的量。那么装柱后,需要用水将甲醇替换出去吗?如果替换,需要像梯度那样逐步增加水吗?...

需要用水替换的。替换的时候直接换成水也没问题的,只是有时候会有少量气泡产生。如果避免产生气泡,采用甲醇的浓度梯度减少,两三个梯度就够了,比如从甲醇先用70%甲醇洗脱一会,再换到30甲醇洗脱,最后换成水。70和30甲醇少量就可以,小半个柱长的体积足够了

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-05-19 11:47:26
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hydros

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
galaxysnow: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2015-05-19 15:53:35
没问题,影响可以忽略不计,我做过

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-05-18 10:08:52
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galaxysnow

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hydros at 2015-05-18 10:08:52
没问题,影响可以忽略不计,我做过

太感谢了,那请问sephadex LH-20用甲醇溶胀,之后想进行梯度洗脱,即先用100%水洗,逐步增加甲醇的量。那么装柱后,需要用水将甲醇替换出去吗?如果替换,需要像梯度那样逐步增加水吗?
历经81难终将修成正果
3楼2015-05-19 11:37:14
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