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蛋白用蒸馏水稀释至低浓度后跑SDS-PAGE用银染没有条带
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| 先配制蛋白母液，浓度为5mg/ml，然后将其用蒸馏水依次稀释至1mg/ml,200ng/ul，100ng/ul，20ng/ul，10ng/ul，然后用2xloading将10ng/ul的蛋白稀释至5ng/ul的上样样品，将其在99度煮5min，再放在冰上5min，交替进行两次，然后将煮后的5ng/ul的蛋白用1xloading稀释至2ng/ul,1ng/ul,0.5ng/ul,0.25ng/ul,0.125ng/ul，最后用1ng/ul,0.5ng/ul,0.25ng/ul,0.125ng/ul的样品上样10ul,用12%的胶跑SDS-PAGE，浓缩胶电压为80v,时间为35min,分离胶电压为120v,时间为60min，最后用银染显色，没有条带，银染做过很多次了，而且用的kit，不会出问题，个人感觉主要问题可能在样品，但是不知道哪里出了问题，求各位大侠指教 |
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