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小亚当1425

新虫 (初入文坛)

[求助] 做淀粉酶、纤维素酶筛选时,真菌生长太快,怎么观察透明圈? 已有3人参与

本人一直在做真菌的产酶活性研究,导师只要求做定性试验,就是观察产淀粉酶、纤维素酶、木聚糖酶等的透明圈!可是我的菌株是高温菌,生长的太快了,一般三天就能长到40mm,可能还没产酶,菌株已经铺满全板了
想求助各位大侠们,有什么改进方法不?
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zmxiaomu

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你可以稀释后再点样啊,培养时间也可以短点。定性检测就可以直接测它透明圈与菌落直径的比值。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2015-05-13 09:36:27
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phoenix.ren

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小亚当1425: 金币+5, ★★★很有帮助, 试过了,效果不错 2015-07-29 16:35:31
这种情况最好的方法是:把已经长好的真菌(确保已经产酶了)平板,在无菌的条件下切成很多小块,再放到淀粉酶检测平板。如果有酶的话,用碘液染,应该会有透明圈。而且切成小块也能做很多条件下(如温度)的酶活性。
当然,如果不想这样做,也可以让真菌在淀粉酶检测平板上长,长得差不多了,把真菌(有时只能刮掉气生菌丝,基内菌丝弄不掉,不然要破坏平板)全部刮掉,再用碘液染。
反正以前这些方法我都用过。都还可以,不过第一种方法最漂亮。
4楼2015-05-14 09:52:25
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phoenix.ren

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 小亚当1425 at 2015-05-14 11:17:14
谢谢,因为定性试验是测量透明圈直径和菌落直径的比值,如果切成小块,小块的直径代表菌落直径吗?再请教一下,一般培养多长时间?...

可以代表类似与菌落直径的参数。
我之前的是培养了48h。
10楼2015-05-14 17:23:32
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wubingqi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果人为抑制他生长,那产酶情况可能也会发生改变,所以不太好办。要么换大点的平板,要么你就冒险试下将培养温度调低一点。
2楼2015-05-12 09:18:41
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小亚当1425

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zmxiaomu at 2015-05-13 09:36:27
你可以稀释后再点样啊,培养时间也可以短点。定性检测就可以直接测它透明圈与菌落直径的比值。

试过稀释后再点样,一样长得很快,培养时间短了,可能还没开始产酶了
5楼2015-05-14 10:12:19
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小亚当1425

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wubingqi at 2015-05-12 09:18:41
如果人为抑制他生长,那产酶情况可能也会发生改变,所以不太好办。要么换大点的平板,要么你就冒险试下将培养温度调低一点。

我试试大平板,温度可能调不了了,我做的是高温菌
6楼2015-05-14 10:14:53
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小亚当1425

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by phoenix.ren at 2015-05-14 09:52:25
这种情况最好的方法是:把已经长好的真菌(确保已经产酶了)平板,在无菌的条件下切成很多小块,再放到淀粉酶检测平板。如果有酶的话,用碘液染,应该会有透明圈。而且切成小块也能做很多条件下(如温度)的酶活性。 ...

想请教一下,将小块放到淀粉检测平板上后,还需要培养一段时间不?
7楼2015-05-14 10:16:35
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phoenix.ren

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 小亚当1425 at 2015-05-14 10:16:35
想请教一下,将小块放到淀粉检测平板上后,还需要培养一段时间不?...

需要培养一段时间的。
8楼2015-05-14 10:36:11
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小亚当1425

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by phoenix.ren at 2015-05-14 10:36:11
需要培养一段时间的。...

谢谢,因为定性试验是测量透明圈直径和菌落直径的比值,如果切成小块,小块的直径代表菌落直径吗?再请教一下,一般培养多长时间?
9楼2015-05-14 11:17:14
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