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mataomatao

禁虫 (正式写手)

★ ★
黄xia: 金币+2, 谢谢 2015-05-14 09:04:15
本帖内容被屏蔽

31楼2015-05-13 16:32:10
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13808906306

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
黄xia: 金币+2, 呵呵,谢谢 2015-05-14 09:04:28
引用回帖:
9楼: Originally posted by 黄xia at 2015-05-11 10:53:41
左边是Marker,中间是空载,右边粗的那条带是表达的蛋白,从图上看说明是表达了的,挂柱的图当时由于想着没挂上,就忘拍了,所以图就不能上传了

图.png
...

Marker跑的很漂亮,赞一个。
32楼2015-05-13 17:07:40
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33楼2015-05-13 17:44:39
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wwwemc

至尊木虫 (文坛精英)


★ ★
黄xia: 金币+2, 谢谢 2015-05-14 09:04:45
祝福顺利
34楼2015-05-13 17:55:43
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祝福
35楼2015-05-13 18:04:23
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★ ★
黄xia: 金币+2, 呵呵,谢谢参与 2015-05-14 09:05:02
36楼2015-05-13 18:18:11
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lha123

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼上说的都不错,现总结一下:
1 确认一下设计的序列是否正确,有无移码现象;
2 可能存在标签被包被,也有可能蛋白之间形成聚体,建议加入一定量的还原剂(NI 柱 耐受范围内)
3 楼主说在非还原胶上目标条带很少,是不是蛋白之间有二硫键形成了多聚体,可有western检测一下
加油!2015
37楼2015-06-03 16:42:14
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yelibio

捐助贵宾 (初入文坛)


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★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
黄xia: 金币+2, 谢谢 2015-06-04 12:21:47
内容已删除
38楼2015-06-03 16:46:43
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总有二狗咬朕

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
黄xia: 金币+1 2015-10-27 09:41:10
一般标签蛋白纯化没见过不挂柱的,一般人家都是结合力太强洗不下来。如果不挂柱可能目的蛋白的(His)6标签在重折叠时没有位于蛋白质分子的表面上,可以考虑溶液环境(pH,离子强度,其他蛋白质分子,缓冲溶液类型,有关影响蛋白质分子表面的试剂等)的因素,可以通过增加所提的蛋白质样品的溶解度来解决;也可能一些蛋白质或DNA与带有(His)6标签的目的蛋白发生了非特异性相互作用;或者有比邻的组氨酸的污染蛋白质与Ni-NTA柱结合。楼主加油
我好累,承受这个年纪不该有的帅!
39楼2015-10-26 16:08:16
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黄xia

金虫 (小有名气)

引用回帖:
39楼: Originally posted by 总有二狗咬朕 at 2015-10-26 16:08:16
一般标签蛋白纯化没见过不挂柱的,一般人家都是结合力太强洗不下来。如果不挂柱可能目的蛋白的(His)6标签在重折叠时没有位于蛋白质分子的表面上,可以考虑溶液环境(pH,离子强度,其他蛋白质分子,缓冲溶液类型,有 ...

谢谢您的回复,目前我的问题已经解决了,谢谢大家的关注
40楼2015-10-27 09:40:31
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